外泌体总RNA提取后，用什么测总RNA量，nanodrop是否能胜任？

旋转的尾音 · 发表于 2016-5-15 23:12:21

外泌体总RNA提取后（Trizol手抽），用什么测总RNA量，nanodrop是否能胜任？还是说需要Qubit等仪器。向大家请教~

旋转的尾音 · 发表于 2016-5-16 13:22:51

Johnny 发表于 2016-5-16 08:39
NANODROP够用了

好的。Johnny，跑qPCR的时候内参的选择有讲究吗？是否和外泌体的来源有关？

hzangs · 发表于 2016-5-16 14:34:46

旋转的尾音发表于 2016-5-16 13:22
好的。Johnny，跑qPCR的时候内参的选择有讲究吗？是否和外泌体的来源有关？ ...

我用过GAPDH，数据看上去还行。也见过用U6的

枫林摇曳 · 发表于 2016-5-16 17:53:30

miRNA一般用U6的比较多

旋转的尾音 · 发表于 2016-5-16 21:57:06

hzangs 发表于 2016-5-16 14:34
我用过GAPDH，数据看上去还行。也见过用U6的

hzangs你好~我这边是做尿液exosome lncRNA，内参的选择能给一下意见吗？就用你说的这两个？

旋转的尾音 · 发表于 2016-5-16 21:57:55

枫林摇曳发表于 2016-5-16 17:53
miRNA一般用U6的比较多

枫林你好，我这边做尿液exo-lncRNA，不知道内参选择有没有规定？

hzangs · 发表于 2016-5-16 22:35:13

旋转的尾音发表于 2016-5-16 21:57
hzangs你好~我这边是做尿液exosome lncRNA，内参的选择能给一下意见吗？就用你说的这两个？ ...

我之前测过我手里的lnc 在exosomes的丰度，当时使用GAPDH做的内参。感觉还可以~

旋转的尾音 · 发表于 2016-5-17 12:45:25

hzangs 发表于 2016-5-16 22:35
我之前测过我手里的lnc 在exosomes的丰度，当时使用GAPDH做的内参。感觉还可以~ ...

感谢hzangs，也是尿液来源吗？

hzangs · 发表于 2016-5-17 14:36:07

旋转的尾音发表于 2016-5-17 12:45
感谢hzangs，也是尿液来源吗？

no 我当时是做的细胞系分泌的

旋转的尾音 · 发表于 2016-5-18 10:43:11

hzangs 发表于 2016-5-17 14:36
no 我当时是做的细胞系分泌的

好嘞，我再查查文献~~~

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