关于PKH67染外泌体

iiibuick

请教一下各位，我想把外泌体先通过静电吸附固定在在玻片上，再用PKH67染细胞膜，这个方法能行得通么。因为看文献里都是先把外泌体稀释在PBS里再染色，最后还得离心。因为每次用到的外泌体很少，如果用文献里的方法的话，估计离心下来也看不到明显沉淀。 所以想着能不能直接对固定好的外泌体染色。

惜名

没做过，不知道。。。
如果你觉得理论上可行，可以试试呢，欢迎回来写试做报告~

iiibuick

惜名 发表于 2016-2-25 15:30
没做过，不知道。。。
如果你觉得理论上可行，可以试试呢，欢迎回来写试做报告~ ...

正在试……为什么我觉得PKH647时间长了好像会晕染开？是我自己的问题还是染料本身的缺陷啊

王一刀

iiibuick 发表于 2016-2-25 20:09
正在试……为什么我觉得PKH647时间长了好像会晕染开？是我自己的问题还是染料本身的缺陷啊 ...

请教前辈，用这种方法染色，结果满意吗？求指教

baishixiaoyaozi

iiibuick 发表于 2016-2-25 20:09
正在试……为什么我觉得PKH647时间长了好像会晕染开？是我自己的问题还是染料本身的缺陷啊 ...

Our lab has the same problem, although we use another fluorescent dye FM43-Fx. I think that because PKH as well as FM are lipophilic dyes, they tend to form micelles-like vesicles in solution and stick to the surface of slides and lead to foggy image. Right now I'm trying to decrease the concentration of my working solution.

Good luck!