什么试剂盒提取外泌体好？试剂盒中的步骤.什么样子？

weaver · 发表于 2015-10-31 20:57:31

大家用的什么试剂盒提取外泌体，买的试剂盒信息能否完整的上传么？实验中用到哪些耗材和试剂呀。菜鸟紧急求助谢啦

丁倩倩 · 发表于 2015-11-6 10:57:54

我们实验室用101Bio比较多
P100PureExo cell medium exosome
P101PureExo serum exosome
西美杰公司代理
提取过程按照说明书即可，比较特殊的是需要在玻璃管中反应

weaver · 发表于 2015-12-8 10:59:43

丁倩倩发表于 2015-11-6 10:57
我们实验室用101Bio比较多
P100PureExo cell medium exosome
P101PureExo serum exosome

谢谢~ 不知道101bio 过程是不是很繁琐呀。。

hzangs · 发表于 2015-12-8 11:51:17

weaver 发表于 2015-12-8 10:59
谢谢~ 不知道101bio 过程是不是很繁琐呀。。

qEV

个人感觉挺好

wangjoseph · 发表于 2015-12-9 14:24:10

Exo-spin, 沉淀只需要1个小时，不需要过夜，更加快速。

liuhaoisboy · 发表于 2015-12-10 22:22:38

hzangs 发表于 2015-12-8 11:51
qEV
个人感觉挺好

实在想问你们是不是拿了钱踢人推销

hzangs · 发表于 2015-12-11 10:45:13

本帖最后由 hzangs 于 2015-12-11 11:04 编辑

liuhaoisboy 发表于 2015-12-10 22:22
实在想问你们是不是拿了钱踢人推销

你要是那么认为，我也没办法。毕竟，我没办法左右别人的思想。

我用过超离，用过沉淀kit，用过SEC。沉淀的kit 我不想再多说什么了

  有条件自然是超离好。
SEC 就是凝胶排阻，目前我用过的就一个qEV，不过听说美国还有一个品牌，有途径的话也可以尝试。
qiagen的kit  我没使用过，所以不敢推荐。  仅此而已

我总不能给你推荐我认为不好用的沉淀kit吧  不是吗

hzangs · 发表于 2015-12-11 11:16:01

本帖最后由 hzangs 于 2015-12-11 11:30 编辑

wangjoseph 发表于 2015-12-9 14:24
Exo-spin, 沉淀只需要1个小时，不需要过夜，更加快速。

你好，第一次听说Cell Guidance System的这个产品。刚刚在google上也查了下。粗略了解，感觉这个产品是使用沉淀法分离exosome 然后在通过一个柱子纯化exosome 去掉杂蛋白。请问层主有没有一些分离产率、蛋白含量之类的数据，很想了解一下这个产品

onlyrush · 发表于 2015-12-11 12:01:57

hzangs 发表于 2015-12-11 11:16
你好，第一次听说Cell Guidance System的这个产品。刚刚在google上也查了下。粗略了解，感觉这个产品是使 ...

用过一次qEV，最后WB检测发现CD63主要分布在5.5-6.5ml,3-4ml中没有CD63，请问你有否遇到这种情况？如何解决？

hzangs · 发表于 2015-12-11 12:34:00

本帖最后由 hzangs 于 2015-12-11 12:42 编辑

onlyrush 发表于 2015-12-11 12:01
用过一次qEV，最后WB检测发现CD63主要分布在5.5-6.5ml,3-4ml中没有CD63，请问你有否遇到这种情况？如何解 ...

我一般杂TSG101 和 ALIX。确实没有遇到过这个情况。
5.5-6.5的话  你杂到的可能不是exosome里的CD63。根据凝胶排阻的性质， 5.5-6.5流出来的组分应该是更小直径的。  我当时使用qEV 的时候 5.5-6.5都是蛋白浓度很高的组分。目测应该是培液里的蛋白。

不仅针对qEV，其他的分离方法，沉淀法超离法等等，都建议你多用几个marker杂一下，  至少应该用2个marker去杂一杂。  根据经验来说，不同的细胞分泌的exosome 表面marker的组成和丰度都有不同。之前中山大学那边的朋友在杂的时候也有个别marker杂不出来，后来换了marker 去杂好像就OK了

希望能帮到你

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什么试剂盒提取外泌体好？试剂盒中的步骤.什么样子？

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