小白求分析电镜结果。。第一次自己制样做TEM！

CheungKL · 发表于 2019-10-12 16:50:31

本帖最后由 CheungKL 于 2019-10-16 13:14 编辑

按照hzangs大神的protocol，用的超离，血浆中的外泌体，做的TEM，求分析一下拍到的是不是外泌体？谢谢大家

zander · 发表于 2019-10-13 23:47:39

这个图挺好的，想知道楼主提取完后，外泌体浓度是多少？做透射的话用了多少ul的外泌体重悬液

hzangs · 发表于 2019-10-14 12:56:56

形态上看，还是比较典型的。

CheungKL · 发表于 2019-10-15 09:13:12

hzangs 发表于 2019-10-14 12:56
形态上看，还是比较典型的。

张老师，我想请教一下背景脏的问题可以通过缩短染色时间优化吗？我是按照你之前打电镜的protocol做的

CheungKL · 发表于 2019-10-15 09:17:41

zander 发表于 2019-10-13 23:47
这个图挺好的，想知道楼主提取完后，外泌体浓度是多少？做透射的话用了多少ul的外泌体重悬液 ...

我没有提蛋白，直接测的BCA，浓度很低只有0.1多mg/ml
重悬用了50ul的pbs

zander · 发表于 2019-10-15 11:51:25

CheungKL 发表于 2019-10-15 09:17
我没有提蛋白，直接测的BCA，浓度很低只有0.1多mg/ml
重悬用了50ul的pbs

好的，谢谢楼主

hzangs · 发表于 2019-10-16 09:23:59

CheungKL 发表于 2019-10-15 09:13
张老师，我想请教一下背景脏的问题可以通过缩短染色时间优化吗？我是按照你之前打电镜的protocol做的 ...

血浆外泌体，确实背景会比较脏，这个应该可以用了。想搞的更干净还是比较难得，需要增加纯化步骤。

CheungKL · 发表于 2019-10-16 10:21:24

hzangs 发表于 2019-10-16 09:23
血浆外泌体，确实背景会比较脏，这个应该可以用了。想搞的更干净还是比较难得，需要增加纯化步骤。 ...

好的，谢谢张老师

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