无血清培养基改变神经母细胞瘤囊泡的数量和蛋白成分

niceman1987

囊泡（EVs）在多种生理过程和病理条件下的细胞间通讯中发挥重要作用，有助于发现新的生物标记物和遗传疾病治疗药物。近期研究发现了细胞合成和释放EV的不同分子机制。然而，关于外界刺激比如细胞培养条件如何影响EV的数量和内容物，目前尚不明确。虽然在无血清培养和有血清培养条件下的N2a神经母细胞瘤细胞，产生的EVs没有生理学和大小差异，但是无血清培养细胞所产生的EVs数量明显增多。而且，之前报道过的与EV合成有关的某些囊泡蛋白（例如：小GTP酶，G蛋白复合体，mRNA加工蛋白和剪接因子），在不同培养条件下的细胞所产生的EV中表达有差异。上述结果有助于理解细胞外因素和细胞间分子通路如何影响EVs的成分组成与释放。

niceman1987

Serum-free culture alters the quantity and protein composition of neuroblastoma-derived extracellular vesicles

惜名

无血清培养的研究僧们，赶紧的看看吧

hereissyk

但是无血清培养细胞所产生的EVs数量明显增多，好神奇。

yy8651

hereissyk 发表于 2015-5-31 21:35
但是无血清培养细胞所产生的EVs数量明显增多，好神奇。

饥饿刺激吧，这个可以说得通的吧。各种不利因素的刺激都可以

seallin

我对WB不是很了解，但是我对该结论的部分观点表示怀疑：你们可以看Veen图，就是无血清和有血清培养的overlap那个图，无血清的鉴定结果几乎包含了几乎所有的有血清鉴定的蛋白。我高度怀疑，首先，有血清不可能洗的很赶紧，血清蛋白仍是主要残留，这大大影响了质谱鉴定结果；其次，无血清培养降低了培养液中的血清浓度（即大大降低了BSA,IgG，TF的浓度），所以才导致无血清鉴定结果更多，而不是作者所谓的影响蛋白组成。在有血清结果里，有许多蛋白没鉴定到，不是因为它没有，是因为被血清掩盖了。所以作者肯定不敢给出污染蛋白的谱图计数。所以，我认为这个实验设计存在较大的问题，至少这个实验说明这个结论是不科学的，太多的问题还没有解决。

niceman1987

seallin 发表于 2015-6-1 21:01
我对WB不是很了解，但是我对该结论的部分观点表示怀疑：你们可以看Veen图，就是无血清和有血清培养的overla ...

分析的有道理，不过这篇文章还是给我们敲了个警钟，至少心里要对无血清培养提取的囊泡谨慎对待与处理，做好被编辑提出此问题的合理回复

seallin

niceman1987 发表于 2015-6-2 00:50
分析的有道理，不过这篇文章还是给我们敲了个警钟，至少心里要对无血清培养提取的囊泡谨慎对待与处理，做 ...

恩，如果实验条件可行，最好还是做有血清的，这样才符合正常培养条件