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标题: PKH67染色的疑惑 [打印本页]
作者: LQLQLQ    时间: 2016-8-10 14:45
标题: PKH67染色的疑惑
各位大神，我按说明书用Pkh67染的exosome，然后等体积1%BSA终止，然后100000g，70mins离心得到沉淀，但是这个沉淀既有exosome也有剩余的染料，我用PBS重悬沉淀再用它处理细胞，但是在共聚焦显微镜下观察，发现沉淀下来的剩余染料把细胞也都染上颜色了，导致exosome和细胞都成绿色，鉴别不开了 ，各位遇到过这种情况吗？怎么解决的，多谢大家了！！
作者: LQLQLQ    时间: 2016-8-11 09:33
Johnny 发表于 2016-8-10 16:50
这个沉淀既有exosome也有剩余的染料是怎么区分的？

没法区分，只是一些沉淀贴在管底，沉淀量明显比我之前提的exosome沉淀多，然后再用这些沉淀处理细胞，细胞膜都被染上色了
作者: wooway    时间: 2016-8-12 09:54
我是用其他的染料但是也遇到了和你一样的问题！我用o.22um的滤头过滤之后就没事了！你可以把你染好的外泌体滴到玻片上拿到荧光显微镜下观察，一般多于的染料都是大颗粒的！
作者: LQLQLQ    时间: 2016-8-13 13:30
Johnny 发表于 2016-8-11 10:22
染料怎么可能有那么多。。。肉眼可见的量？

对，黄色的沉淀贴在管底，不多，但是肉眼可见
作者: LQLQLQ    时间: 2016-8-13 13:31
wooway 发表于 2016-8-12 09:54
我是用其他的染料但是也遇到了和你一样的问题！我用o.22um的滤头过滤之后就没事了！你可以把你染好的外泌体 ...

恩，好的，太感谢你了！！
作者: 崔雪娇123    时间: 2017-5-5 20:58
wooway 发表于 2016-8-12 09:54
我是用其他的染料但是也遇到了和你一样的问题！我用o.22um的滤头过滤之后就没事了！你可以把你染好的外泌体 ...

请教一下，您用0.22um的滤头滤的是荧光染料吗
作者: JKF    时间: 2018-1-22 20:53
wooway 发表于 2016-8-12 09:54
我是用其他的染料但是也遇到了和你一样的问题！我用o.22um的滤头过滤之后就没事了！你可以把你染好的外泌体 ...

请问 重新超离之后可以看到沉淀吗
作者: 15626422377    时间: 2020-8-30 22:47
版主最后怎么处理的？ 我现在也遇到同样的问题啊！！！求救！！！
作者: yxyyjs    时间: 2021-2-25 16:53
同样求助，染完pkh26，再次上10万g离心，竟然能看到沉淀，想不通，多余染料也被离心下来了吗？



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