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标题: 外泌体miRNA提取用什么？ [打印本页]
作者: huang_0207    时间: 2017-5-10 10:46
标题: 外泌体miRNA提取用什么？
最近在做外泌体miRNA方面实验，想问各位大神们，大家都是用什么方法提取外泌体中的miRNA，是用哪家的试剂盒还是用trizol？如果用trizol的话，miRNA的含量会不会低后续做qPCR等会不会受到影响？
作者: hzangs    时间: 2017-5-10 10:57
有朋友用TRIZOL LS。 跑qPCR 可以
作者: huang_0207    时间: 2017-5-10 11:25
hzangs 发表于 2017-5-10 10:57
有朋友用TRIZOL LS。 跑qPCR 可以

谢谢hzangs大神
作者: 张宏道    时间: 2017-5-10 15:05
使用的trizol，最经典的方法，不会有问题。
作者: huang_0207    时间: 2017-5-10 19:34
张宏道 发表于 2017-5-10 15:05
使用的trizol，最经典的方法，不会有问题。

你好，之前搜到这篇文献，“Assessing cellular and circulating miRNA recovery: the impact of the RNA isolation method and the quantity of input material“其中结论说到：


Concerning the phenol-based method of Trizol® LS, it resulted in RNA extracts with very low purity which affected RT-qPCR efficiency, albeit acceptable results were obtained with high input material. Nevertheless, we do not recommend this method for miRNA studies owing to (1) the reproducibility issues that may arise from the poor sample purity,(2) the previously reported selective loss of small RNA molecules with low GC content30, and (3) the availabilityof other methods demonstrating better results for miRNA analysis.


不知道你对于这个问题是怎么看的
作者: 张宏道    时间: 2017-5-11 09:13
huang_0207 发表于 2017-5-10 19:34
你好，之前搜到这篇文献，“Assessing cellular and circulating miRNA recovery: the impact of the RNA ...

我觉得这个问题需要比较全面的进行比较和分析，因为trizol结合醇沉淀的方法会有其局限性，但其他的方法也会有其自身的问题。具体问题具体分析吧，就我自身经验我使用过trizol和另外一块column based kit（名字不提了），提取的RNA跑2100结果发现，该column kit丢失掉了挺多RNA组分的。所以后来就一直采用trizol结合醇沉的方法了。我也希望有人能对这个问题有比较全面的比较。
作者: huang_0207    时间: 2017-5-11 12:05
张宏道 发表于 2017-5-11 09:13
我觉得这个问题需要比较全面的进行比较和分析，因为trizol结合醇沉淀的方法会有其局限性，但其他的方法也 ...

谢谢解答，对这个问题我总算有了些眉目
作者: 微微的小龙虾    时间: 2017-5-22 16:36
张宏道 发表于 2017-5-11 09:13
我觉得这个问题需要比较全面的进行比较和分析，因为trizol结合醇沉淀的方法会有其局限性，但其他的方法也 ...

你好，请问你做的是细胞还体液的 miRNA？能不能发我一份步骤
作者: 微微的小龙虾    时间: 2017-5-25 10:31
hzangs 发表于 2017-5-10 10:57
有朋友用TRIZOL LS。 跑qPCR 可以

您好，请问一下trizol 可以吗？还是只能用 trizol ls 法
作者: doctorguotie    时间: 2017-6-30 17:11
使用的trizo
作者: milaomai    时间: 2017-7-1 21:07
使用的trizol，最经典的方法
作者: milaomai    时间: 2017-7-1 21:08
使用的trizol，最经典的方法
作者: zzycircle    时间: 2017-7-21 20:12
张宏道 发表于 2017-5-11 09:13
我觉得这个问题需要比较全面的进行比较和分析，因为trizol结合醇沉淀的方法会有其局限性，但其他的方法也 ...

请问用trizol提的步骤是如何 谢谢
作者: 深呼吸的行者    时间: 2017-8-17 22:29
试剂盒法有没有改进过方法的？比如柱子是否需要活化一下？
作者: zzycircle    时间: 2017-9-9 08:45
张宏道 发表于 2017-5-10 15:05
使用的trizol，最经典的方法，不会有问题。

你好，请问一下 我用超离的方法提取血浆的外泌体之后 直接加trizol 提rna吗？还是要先用pbs重悬之后在家trizol再提？  还有重悬用多少pbs 加多少trizol，谢谢啦
作者: urology_gxl    时间: 2017-12-19 23:15
QIAGEN exoRNeasy
作者: tianyangfan    时间: 2018-7-25 16:30
I am also innocent of this area, learning from your sharings.thk.
作者: yanxuejun411    时间: 2018-9-11 11:34
楼主能否发我一份外泌体miRNA提取步骤呀 421698293@QQ.COM
作者: huang_0207    时间: 2018-9-12 21:39
yanxuejun411 发表于 2018-9-11 11:34
楼主能否发我一份外泌体miRNA提取步骤呀

组织怎么提，外泌体也是怎么提
作者: 莫等闲    时间: 2018-12-29 15:50
您好，楼主，请问做的是 miRNA？能不能发我一份步骤，谢谢
作者: peggy4598690    时间: 2019-2-11 13:31
zzycircle 发表于 2017-9-9 08:45
你好，请问一下 我用超离的方法提取血浆的外泌体之后 直接加trizol 提rna吗？还是要先用pbs重悬之后在家t ...

请问如何用trizol提? 能否向您要个步骤? 谢谢
作者: saertuzzz    时间: 2019-5-29 16:49
zzycircle 发表于 2017-9-9 08:45
你好，请问一下 我用超离的方法提取血浆的外泌体之后 直接加trizol 提rna吗？还是要先用pbs重悬之后在家t ...

你好~~请问你这个问题解决了么？我也想知道提取血浆外泌体miRN，分离外泌体之后需要用PBS重悬么
作者: lsy    时间: 2019-9-23 16:23

我用的是trizo
作者: CheungKL    时间: 2019-10-18 16:51
trizol 和trizol LS有区别吗



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