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标题: 无血清培养基改变神经母细胞瘤囊泡的数量和蛋白成分 [打印本页]

作者: niceman1987    时间: 2015-5-29 15:32
标题: 无血清培养基改变神经母细胞瘤囊泡的数量和蛋白成分
囊泡(EVs)在多种生理过程和病理条件下的细胞间通讯中发挥重要作用,有助于发现新的生物标记物和遗传疾病治疗药物。近期研究发现了细胞合成和释放EV的不同分子机制。然而,关于外界刺激比如细胞培养条件如何影响EV的数量和内容物,目前尚不明确。虽然在无血清培养和有血清培养条件下的N2a神经母细胞瘤细胞,产生的EVs没有生理学和大小差异,但是无血清培养细胞所产生的EVs数量明显增多。而且,之前报道过的与EV合成有关的某些囊泡蛋白(例如:小GTP酶,G蛋白复合体,mRNA加工蛋白和剪接因子),在不同培养条件下的细胞所产生的EV中表达有差异。上述结果有助于理解细胞外因素和细胞间分子通路如何影响EVs的成分组成与释放。

作者: niceman1987    时间: 2015-5-29 15:36
Serum-free culture alters the quantity and protein composition of neuroblastoma-derived extracellular vesicles
作者: 惜名    时间: 2015-5-31 16:17
无血清培养的研究僧们,赶紧的看看吧
作者: hereissyk    时间: 2015-5-31 21:35
但是无血清培养细胞所产生的EVs数量明显增多,好神奇。
作者: yy8651    时间: 2015-5-31 22:33
hereissyk 发表于 2015-5-31 21:35
但是无血清培养细胞所产生的EVs数量明显增多,好神奇。

饥饿刺激吧,这个可以说得通的吧。各种不利因素的刺激都可以
作者: seallin    时间: 2015-6-1 21:01
我对WB不是很了解,但是我对该结论的部分观点表示怀疑:你们可以看Veen图,就是无血清和有血清培养的overlap那个图,无血清的鉴定结果几乎包含了几乎所有的有血清鉴定的蛋白。我高度怀疑,首先,有血清不可能洗的很赶紧,血清蛋白仍是主要残留,这大大影响了质谱鉴定结果;其次,无血清培养降低了培养液中的血清浓度(即大大降低了BSA,IgG,TF的浓度),所以才导致无血清鉴定结果更多,而不是作者所谓的影响蛋白组成。在有血清结果里,有许多蛋白没鉴定到,不是因为它没有,是因为被血清掩盖了。所以作者肯定不敢给出污染蛋白的谱图计数。所以,我认为这个实验设计存在较大的问题,至少这个实验说明这个结论是不科学的,太多的问题还没有解决。
作者: niceman1987    时间: 2015-6-2 00:50
seallin 发表于 2015-6-1 21:01
我对WB不是很了解,但是我对该结论的部分观点表示怀疑:你们可以看Veen图,就是无血清和有血清培养的overla ...

分析的有道理,不过这篇文章还是给我们敲了个警钟,至少心里要对无血清培养提取的囊泡谨慎对待与处理,做好被编辑提出此问题的合理回复
作者: seallin    时间: 2015-6-2 13:16
niceman1987 发表于 2015-6-2 00:50
分析的有道理,不过这篇文章还是给我们敲了个警钟,至少心里要对无血清培养提取的囊泡谨慎对待与处理,做 ...

恩,如果实验条件可行,最好还是做有血清的,这样才符合正常培养条件




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