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标题: 小白求分析电镜结果。。第一次自己制样做TEM! [打印本页]

作者: CheungKL    时间: 2019-10-12 16:50
标题: 小白求分析电镜结果。。第一次自己制样做TEM!
本帖最后由 CheungKL 于 2019-10-16 13:14 编辑

按照hzangs大神的protocol,用的超离,血浆中的外泌体,做的TEM,求分析一下拍到的是不是外泌体?谢谢大家



作者: zander    时间: 2019-10-13 23:47
这个图挺好的,想知道楼主提取完后,外泌体浓度是多少?做透射的话用了多少ul的外泌体重悬液
作者: hzangs    时间: 2019-10-14 12:56
形态上看,还是比较典型的。
作者: CheungKL    时间: 2019-10-15 09:13
hzangs 发表于 2019-10-14 12:56
形态上看,还是比较典型的。

张老师,我想请教一下背景脏的问题可以通过缩短染色时间优化吗?我是按照你之前打电镜的protocol做的
作者: CheungKL    时间: 2019-10-15 09:17
zander 发表于 2019-10-13 23:47
这个图挺好的,想知道楼主提取完后,外泌体浓度是多少?做透射的话用了多少ul的外泌体重悬液 ...

我没有提蛋白,直接测的BCA,浓度很低只有0.1多mg/ml
重悬用了50ul的pbs
作者: zander    时间: 2019-10-15 11:51
CheungKL 发表于 2019-10-15 09:17
我没有提蛋白,直接测的BCA,浓度很低只有0.1多mg/ml
重悬用了50ul的pbs

好的,谢谢楼主
作者: hzangs    时间: 2019-10-16 09:23
CheungKL 发表于 2019-10-15 09:13
张老师,我想请教一下背景脏的问题可以通过缩短染色时间优化吗?我是按照你之前打电镜的protocol做的 ...

血浆外泌体,确实背景会比较脏, 这个应该可以用了。 想搞的更干净  还是比较难得,需要增加纯化步骤。
作者: CheungKL    时间: 2019-10-16 10:21
hzangs 发表于 2019-10-16 09:23
血浆外泌体,确实背景会比较脏, 这个应该可以用了。 想搞的更干净  还是比较难得,需要增加纯化步骤。 ...

好的,谢谢张老师




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