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标题: trizol提取miRNA [打印本页]

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作者: emilyneuro    时间: 2016-1-26 15:36
标题: trizol提取miRNA
问大家一个小白的问题啊，我在用trizol提取miRNA的时候，乙醇不小心用的75%的，miRNA会不会都没有沉下来啊？

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作者: 大鹏子    时间: 2016-1-26 20:22
最后洗涤那步用75%和80%都可以吧

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作者: emilyneuro    时间: 2016-1-26 21:34

大鹏子 发表于 2016-1-26 20:22
最后洗涤那步用75%和80%都可以吧

我看的文献写的是80%，不知道会不会有影响

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作者: 张宏道    时间: 2016-1-27 10:43
没关系，我用过70%的。

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作者: emilyneuro    时间: 2016-1-27 13:48

张宏道 发表于 2016-1-27 10:43
没关系，我用过70%的。

太好了，我提超离外泌体的时候就啥都没有看见，提miRNA的时候也啥都看不见，总觉得会失败。谢谢啦！

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作者: 胖子的心境    时间: 2016-3-21 10:09
要是什么都看见了，可能你也得担心是不是有杂质

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作者: dancing    时间: 2017-4-13 16:28
我怎么看到的提取步骤就是用75%的啊
RNA 沉淀的清洗。
小心弃去上清, 切勿触及沉淀， 残留少量异丙醇没有关系。 加入与 RNAiso Plus 等量的 75％乙醇， 轻
轻上下颠倒洗涤离心管管壁， 7,500×g 4℃离心 5 分钟后小心弃去上清，切勿触及沉淀。

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作者: 微微的小龙虾    时间: 2017-5-22 16:38
楼主能发我一份详细的步骤吗是不是和普通的 miRNA 步骤一样啊

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作者: 李顺利    时间: 2020-8-1 18:15
你好，请问能求一份详细的抽提步骤吗？非常感谢

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作者: 李顺利    时间: 2020-8-15 21:32
同求详细步骤，楼主好心人

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作者: hope    时间: 2020-8-17 21:33

李顺利 发表于 2020-8-1 18:15
你好，请问能求一份详细的抽提步骤吗？非常感谢

前段时间我才做出来了，也是试了好久，和前面和常规方法一样，在氯仿分层后去上清加入takara9094助沉剂，按照9094的步骤来做后面就好了，后续都用的takara的试剂盒，效果都还可以。以前没有加这个助沉剂，提取效果不好，也是看了hzangs的推荐，才改进了方案，希望对你能有帮助

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作者: 李顺利    时间: 2020-8-26 09:45

hope 发表于 2020-8-17 21:33
前段时间我才做出来了，也是试了好久，和前面和常规方法一样，在氯仿分层后去上清加入takara9094助沉剂， ...

好的，非常感谢。

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