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标题: DTT对CD系列marker的影响 [打印本页]

作者: 微泡biomarker    时间: 2016-3-17 20:17
标题: DTT对CD系列marker的影响
看了Thery, C., et al. (2006). "Isolation and characterization of exosomes from cell culture supernatants and biological fluids." Curr Protoc Cell Biol Chapter 3: Unit 3 22. 里面的表格写着 do not use 2-mercaptoethanol or DTT in sample, 请问有没有知道这是为什么啊? 跪求答案

作者: Bridgen桥生物    时间: 2016-3-17 22:01
因为DTT能破坏蛋白的双链,起到类似还原剂的作用
作者: 大鹏子    时间: 2016-3-18 11:00
Bridgen桥生物 发表于 2016-3-17 22:01
因为DTT能破坏蛋白的双链,起到类似还原剂的作用

DTT作为还原剂不是保护蛋白不被氧化的么,为什么会破坏蛋白的双链呢??
作者: Bridgen桥生物    时间: 2016-3-18 17:11
ㄧ般膜蛋白上面是靠多穿膜小蛋白所组成,组成过程中其中一个重要的键结是双硫键(-S-S-),ㄧ但加了DTT或2-ME就会打断双硫键(-SH   HS-)这些穿膜小蛋白就不会结合在一起。抗体在设计的时候有可能认到这些穿膜小蛋白的连结处,ㄧ但加入DTT或2-ME,这破坏连结处,抗体就会认不到抗原。




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