外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

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楼主: Johnny
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想统计下大家用超速离心时一次用多少量的细胞上清才够用

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发表于 2019-10-25 11:06:11 | 只看该作者

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bokelu 发表于 2019-3-18 09:42
使用NTA测量粒子大小,我们就是这么做的。测量出来的粒子体积在50nm-200nm之间,峰值为100nm,90百分位数 ...

浓度,请问您NTA测出来浓度怎么样
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发表于 2019-8-22 09:33:04 | 只看该作者

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暮色恭喜发财 发表于 2015-8-18 10:39
请教一下,0.22um过滤的目的是什么?

除掉大于220nm的颗粒
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发表于 2019-8-22 08:48:40 | 只看该作者

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木瓜31 发表于 2015-5-7 21:37
那一般多少量细胞上清超离够做电镜鉴定呢?

看细胞以及细胞密度吧,电镜我用过30ml上清
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发表于 2019-6-10 14:20:03 | 只看该作者

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发表于 2019-5-9 19:27:28 | 只看该作者

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luckkit 发表于 2015-4-21 13:35
偶觉得还少了两个参数,细胞类型和数量

请问您的经验需要多少数量的细胞提取外泌体?我试过20*10^6细胞(2个10cm dish),一次跑不出外泌体mark,但是有一次跑出来一个Alix的条带
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发表于 2019-4-18 19:19:09 | 只看该作者

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T75的培养瓶  四瓶
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发表于 2019-3-27 12:21:34 | 只看该作者
wwpapple 发表于 2018-8-14 11:28
想请教一下,因为实验室没有超高速离心机,用试剂盒提取外泌体的话,提取的量够后续转染或者共培养实验吗? ...

请问你之后是怎么解决的?
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发表于 2019-3-27 12:10:53 | 只看该作者
bobo 发表于 2015-5-26 10:25
我想用试剂盒提exosome,那么如何将100ml的细胞培养液浓缩到4ml,从而使培养液中的exosome浓度大些 ...

你做的效果怎么样
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发表于 2019-3-27 10:10:44 | 只看该作者

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我是用的超滤管浓缩后再用试剂提取的,有人用过吗?效果如何
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发表于 2019-3-18 09:42:53 | 只看该作者

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teddy溶溶 发表于 2018-10-25 15:15
看了好多人反应包括测序公司都说细胞上清提取出的exo量少的可怜,我这次决定用20以上个培养皿收集。请问大 ...

使用NTA测量粒子大小,我们就是这么做的。测量出来的粒子体积在50nm-200nm之间,峰值为100nm,90百分位数的时候体积是132,基本都是在外泌体那个体积之内。
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