为什么我流式染外泌体表面标记总然不出来

免疫小子 · 发表于 2016-12-28 21:15:36

用的是4um的乳胶珠invitregen的，直接和外泌体孵育过夜，甘氨酸终止，然后染表面荧光抗体，同时同型染外泌体结合的微珠作为对照，结果显示与同型相比，外泌体表面标记并没有发现阳性，WB做出来证明外泌体含有该抗原。做了好几次都没有做出来，是不是我用的外泌体量不够，可是这已经是WB的5倍量了，请问各位老师通道，这个染外泌体有什么需要注意的地方，能不能提供一份切实可行的染色Protocol？谢谢了

keith · 发表于 2022-10-27 09:24:17

由于没有发帖权限接楼主的贴子问一下，有哪位大神用表达CD63-eGFP的细胞提的外泌体做过细胞摄取后的流式检测荧光吗？我做了好几次不稳定不说，而且阳性率最高只有10%左右，找了好多篇文章都没看到做完细胞摄取实验之后的摄取率，所以想在站里问一下有没有同行做过类似的实验能分享一下经验的，谢谢！

jinwandalaohu · 发表于 2022-1-14 09:36:05

肯定啊朋友，据我所知流式的分辨率达不到外泌体的粒径

ShirleyZ · 发表于 2021-9-8 20:32:58

yudan 发表于 2021-8-30 22:42
请问您的问题解决了吗？我遇到同样的问题，阳性率一直很低。。求指教

请问你的问题解决了吗？我用这个方法cd9阳性率一直在1%,几乎没有。谢谢！

yudan · 发表于 2021-8-30 22:42:03

请问您的问题解决了吗？我遇到同样的问题，阳性率一直很低。。求指教

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为什么我流式染外泌体表面标记总然不出来

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