外泌体wb结果

CARD · 发表于 2017-8-13 20:23:09

最近用60mL细胞上清液提取外泌体跑了一次wb，但是结果很奇怪，细胞刮取蛋白裂解后三个指标都出现了，而外泌体却一个都没有，这是什么原因？是我没提取成功，还是浓度太低，又或是其他什么原因，只能求助于大家

cxx123 · 发表于 2023-6-27 10:25:43

请问找到解决方法了吗？可能你的浓度太低了，你用多少PBS重悬？我没有用裂解液重悬的，是细胞跟外泌体都有条带

DBLB · 发表于 2019-10-21 12:12:38

一粟发表于 2018-9-28 17:26
我也是。提取的细胞总蛋白可以跑出CD63 CD9，但是外泌体不行，另外你们提取外泌体全程都是在冰上操作吗？我 ...

是在冰上做的。我也看不见。你做出来浓度怎么样

DBLB · 发表于 2019-10-21 12:11:59

阿赵发表于 2018-9-17 20:22
请问一下，前段时间不是还说不要用有DTT的buffer吗。那要加的话不就和常见那种没什么区别啦。到底用哪 ...

非还原性的loading buffer

邱邱-- · 发表于 2019-3-25 19:10:40

请问一下提取的外泌体WB之间加细胞裂解液吗

ydzheng · 发表于 2019-3-5 20:55:06

济慈发表于 2018-12-12 15:12
我们是用超离提取的，也是偶尔能看到沉淀，在管底，圆圆的很小一块，没有在冰上操作 ...

请问你找到问题原因了吗？我是新手也是出现这种状况，不知道是哪出了问题

济慈 · 发表于 2018-12-12 15:12:52

一粟发表于 2018-9-28 17:26
我也是。提取的细胞总蛋白可以跑出CD63 CD9，但是外泌体不行，另外你们提取外泌体全程都是在冰上操作吗？我 ...

我们是用超离提取的，也是偶尔能看到沉淀，在管底，圆圆的很小一块，没有在冰上操作

济慈 · 发表于 2018-12-12 15:11:14

一粟发表于 2018-9-28 17:26
我也是。提取的细胞总蛋白可以跑出CD63 CD9，但是外泌体不行，另外你们提取外泌体全程都是在冰上操作吗？我 ...

我们是用超离提取的，也是偶尔能看到沉淀，在管底，圆圆的很小一块，没有在冰上操作

一粟 · 发表于 2018-9-28 17:26:37

我也是。提取的细胞总蛋白可以跑出CD63 CD9，但是外泌体不行，另外你们提取外泌体全程都是在冰上操作吗？我怎么超离完后根本看不到沉淀呢

阿赵 · 发表于 2018-9-17 20:22:52

meiling 发表于 2017-8-15 08:40
请问你做WB的流程是什么呢？有加DTT吗

请问一下，前段时间不是还说不要用有DTT的buffer吗。那要加的话不就和常见那种没什么区别啦。到底用哪种呀，跑不出来啊。我既用过没加的也用过加了的，均没有跑出来。

xiaobairenou · 发表于 2018-9-10 15:37:14

请问你的这幅带marker的条带图怎么曝光出来的？我们成像时marker不显示

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