外泌体蛋白定量

meiling · 发表于 2017-8-29 15:32:49

请问大家都是用什么方法定量外泌体蛋白的？BCA法？还是考马斯亮蓝？哪种方法好一些呢？

MGX · 发表于 2021-1-16 16:17:46

BCA和银染、WB

120625 · 发表于 2019-11-14 17:35:02

科研小白请教：外泌体蛋白如何定量检测？

songzizhu · 发表于 2018-4-24 00:38:15

很多人都用 RIPA吧

peggy4598690 · 发表于 2017-10-17 13:41:47

本帖最后由 peggy4598690 于 2019-2-25 09:20 编辑

vvvv 发表于 2017-8-30 11:44
请问你使用RIPA裂解液裂解了多久？如果提取蛋白的话外泌体提取液一定要裂解是么？
...

我最后一步超离后直接使用RIPA+PPI去把pellet打下来,放-80度C冰箱裂解外泌体overnight,之后用13000rpm离心后取上清液

落叶知秋 · 发表于 2017-9-14 17:26:11

vvvv 发表于 2017-8-30 11:44
请问你使用RIPA裂解液裂解了多久？如果提取蛋白的话外泌体提取液一定要裂解是么？
...

那就要看看你的蛋白定位在哪里了，如果是膜蛋白的话就不太需要，例如：Identification of Developmental Endothelial Locus-1 on Circulating Extracellular Vesicles as a Novel Biomarker for Early Breast Cancer Detection。如果不是膜蛋白，理论上应该要裂解的，裂解的方法有很多，我试过RIPA，也是过自己配的裂解液加超声。