SBI Exo-Quick TC提取血清exo经验与困惑

惜名 · 发表于 2015-7-7 17:03:39

SBI的Exo-Quick有两种，一种就是Exo-Quick，说明书提示用以提取血清exo；还有一种是Exo-Quick TC，用以提取培养基或尿液exo。
我在想，培养基不就是10%FBS+DMEM之类的么，那么我如果用PBS（或DMEM、IMDM）稀释血清，制造一种类似培养基的东西，然后用Exo-Quick TC是否可以提取了呢？

抱着试试看的态度，我选择了Exo-Quick TC。
取100ul小鼠血清（分别为sham和心梗小鼠），用400ul PBS稀释，得500ul mix。加入100ul Exo-Quick TC，此时立即出现浑浊（什么情况？）
Anyway，继续做。4度静置40min左右，1500g*30min离心，见EP管底部有较多白色沉淀。再用200ul PBS重悬吹打，得清亮、透明混合液。

鉴定不打算做了，直接做表征。观察其对靶细胞是否有作用。
欲知后事如何，且听下回分解。

MMM · 发表于 2021-1-8 17:36:28

Johnny 发表于 2015-7-7 17:10
立即出现浑浊是因为你稀释的血清里面蛋白和盐离子的成分过高。如果将细胞培养上清浓缩高倍数后用Exo-Quick ...

请问我两倍稀释血清差速提MVs时，20000g 40min后管壁也是有白色沉淀一晃就散单独洗出来吹打可消失这也是这个原因吗

小泌 · 发表于 2020-3-16 18:33:11

如果纯度不够可以用外泌体的专业纯化柱，纯度更高，提取速度更快。欢迎联系Q1813061338

caoruican · 发表于 2020-1-14 17:17:36

谢谢分享！

hj978 · 发表于 2019-11-6 21:55:47

hj978 发表于 2019-11-6 21:52
问一个问题，为什么我看见好多人提取血清外泌体使用Exo-Quick TC，而不是Exo-Quick LP呢 ...

Exo-Quick LP是专门用来提取血清或血浆的，Exo-Quick TC用来提取尿液等的，为什么血清也会使用Exo-Quick TC，我看见不止一篇是这样用的，Exo-Quick LP使用很麻烦，我也想用Exo-Quick TC提取血清外泌体，但是不知道具体缘由

hj978 · 发表于 2019-11-6 21:52:55

问一个问题，为什么我看见好多人提取血清外泌体使用Exo-Quick TC，而不是Exo-Quick LP呢

whulwj2019 · 发表于 2019-10-28 15:14:08

后来就没有然后了？

ronaldchen · 发表于 2019-3-8 17:56:28

全是杂志，外泌体有，全被99.9%的杂志掩盖了

peggy4598690 · 发表于 2018-12-10 12:52:22

想请问最后做出来有成功吗？

vetmeng-exo · 发表于 2018-10-19 09:59:42

Johnny 发表于 2015-7-8 21:03
不能变透明的话，就提不出来了，因为把蛋白全部沉淀了，整个体系一般都是固体 ...

您好，我最近用SBI试剂盒提取外泌体，提取试剂加进去后液体变浑浊，混匀后也不是特别澄清，提取后沉淀都是红色，胶冻状。按照您说的是因为细胞培养上清浓缩倍数太高造成的吗？那一般都多少倍浓缩比较合适呐？我的样品很珍贵，还有补救的办法吗？请赐教，万分感谢。

惜名 · 发表于 2015-7-8 15:01:45

Johnny 发表于 2015-7-8 13:03
嗯嗯，吹打后能变透明就OK

进展不错O(∩_∩)O哈！

如果不能变透明，说明什么问题呢？
是因为杂质太多么？

		自动登录	找回密码
密码			立即注册

SBI Exo-Quick TC提取血清exo经验与困惑

站长推荐 /1