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关于SBI试剂盒

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发表于 2015-9-11 10:59:49 | 只看该作者 回帖奖励 |正序浏览 |阅读模式
本人刚刚试着开始提纯,用的是SBI的试剂盒,步骤也都是按照SBI给出的官方手册。但是问题来了,第一次,我用了5mL的细胞培养液(HeLa细胞,培养24小时,加了小牛血清),按照步骤走下来最后离心一点沉淀也木有啊,离心一次我还不死心,继续3000g二次离心20分钟,依旧木有沉淀。我看网上好多人又这个问题,有的说是细胞培养液太少,意思是要浓缩么?还有的说最后一次离心提高转速的。我想想试剂盒也蛮更贵的,还是先看看大家的意见再实验吧。用SBI试剂盒的有这个问题么?都是怎么解决的呀~
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发表于 2017-2-27 16:36:27 | 只看该作者
alidelong 发表于 2016-5-13 13:29
用试剂盒提取的外泌体不纯。传统的高速离心与蔗糖梯度密度离心比较好

能否分享一份蔗糖梯度密度离心分离外泌体的protocol? 邮箱:yangfuhua1988@163.com
感激不尽啊~~~
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发表于 2017-2-23 22:35:10 | 只看该作者
同问啊
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发表于 2017-2-14 16:03:15 | 只看该作者
lyougen 发表于 2016-4-23 22:07
Invitrogen公司试剂盒说明书上说,离心之后得到的外泌体是看不到的,要用PBS重悬。 ...

不知道你最后又得到外泌体?这个试剂盒产量如何?
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发表于 2016-5-13 02:33:12 | 只看该作者
我用的SBI,15ml上清提取,可以看到明显的沉淀
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发表于 2016-4-23 22:07:40 | 只看该作者
Invitrogen公司试剂盒说明书上说,离心之后得到的外泌体是看不到的,要用PBS重悬。
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发表于 2016-4-20 16:37:34 | 只看该作者
个人认为是量太低造成的
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发表于 2016-4-20 15:43:33 | 只看该作者
Bridgen桥生物 发表于 2016-3-15 22:40
这位同学现在问题解决了么?是在北京么?我们国外的技术正好在北京,他们2010年开始一直在研究外泌体,最 ...

您好,我现在在用SBI的试剂盒提血清外泌体,提取中有些问题想咨询下,不知能不能加您微信。微信号:ZJ879264523
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发表于 2016-3-16 14:58:32 | 只看该作者
Bridgen桥生物 发表于 2016-3-15 22:40
这位同学现在问题解决了么?是在北京么?我们国外的技术正好在北京,他们2010年开始一直在研究外泌体,最 ...

您好,我是医科院肿瘤医院外科大夫,最近也在做外泌体相关研究,想用SBI试剂盒,能否加您私聊?微信:pumcguowei。谢谢。
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发表于 2016-3-15 22:40:37 来自手机 | 只看该作者
lwq33 发表于 2016-3-15 13:51
不知道楼主后来是如何改进的啊?我目前也遇到这个问题了,10ml上清用SBI的kit一点沉淀都看不到。。。 ...

这位同学现在问题解决了么?是在北京么?我们国外的技术正好在北京,他们2010年开始一直在研究外泌体,最近在,清华大学,中科院以及北京肿瘤医院等做讲座交流,有机会可以互交流学习一下。
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沙发
发表于 2016-3-15 13:51:59 | 只看该作者
不知道楼主后来是如何改进的啊?我目前也遇到这个问题了,10ml上清用SBI的kit一点沉淀都看不到。。。
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