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有人使用过qiage的exoEasy Maxi Kit吗?

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发表于 2015-10-28 12:02:59 | 只看该作者 回帖奖励 |正序浏览 |阅读模式
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发表于 2019-10-28 10:24:34 | 只看该作者
亲测,效果不行
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发表于 2019-7-26 18:53:32 | 只看该作者
hzangs 发表于 2015-11-2 10:07
以qiagen在生物领域的口碑,我感觉 这个kit应该不会有什么大问题。提取的RNA应该不会错。
但是  不知道qi ...

我以前是qiagen的代理商,这个盒子肯定要比沉淀法好一些。但没有和qEV,wako的免疫亲和kit对比过(有文献说qiagen这个也会有一些杂蛋白)。这个试剂盒的洗脱液里含有高离序盐,说明书和技术都说这个试剂盒提出的外泌体能用于细胞培养。但是有客户反应,加了这个试剂盒提取的外泌体后,细胞会变形。
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发表于 2018-3-5 09:25:13 | 只看该作者
用试剂盒提过几次,我们的上清量很大,做过电镜囊泡比较少,提了几次浓度都特别低,冻干蛋白后浓度才勉强到1,做WB效果很差,有没有大神指点一下。
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发表于 2017-4-16 18:48:46 | 只看该作者
张宏道 发表于 2015-10-30 14:41
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4552735/
这是那篇文献,可以看一下。据我了解,qiagen用 ...

请问如果不用过滤膜而用离心机过滤的方法预过滤血浆样品,应该如何设置转速和时间才能让样品中大于0.8μm的分子去除呢?
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发表于 2015-11-9 10:54:58 | 只看该作者
张宏道 发表于 2015-11-9 10:40
我觉得quibit更加准一些,毕竟只检测RNA的信号,nanodrop就会受到DNA蛋白质等杂物质的影响,测得浓度高一 ...

最后好像是用14ul洗脱下来的..
midi一次上样就只能上1ml吧?多了只能用maxi~上样4ml以下..
血清浓度好像比上清和尿更低吧.~
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 楼主| 发表于 2015-11-9 10:40:11 | 只看该作者
咏咩咩 发表于 2015-11-9 09:37
我试过50ml尿液浓缩成3-4ml再用这个试剂盒.~RNA nanodrop 有15ng/ul吧.但是Quibit出来是5ng/ul左右.用的 ...

我觉得quibit更加准一些,毕竟只检测RNA的信号,nanodrop就会受到DNA蛋白质等杂物质的影响,测得浓度高一些也正常。就算是5ng/ul,那么有多少ul呢?如果是20,那也有100ng了。不知道你能不能帮我问问你师姐用midi的一次能得到多少RNA啊,我好有个心理准备收集多少样品做实验,谢谢谢谢!
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发表于 2015-11-9 09:37:09 | 只看该作者
张宏道 发表于 2015-11-6 13:33
一般你们是从什么样品里面抽exosome?然后比如用midi的一次能得到多少RNA啊? ...

我试过50ml尿液浓缩成3-4ml再用这个试剂盒.~RNA nanodrop 有15ng/ul吧.但是Quibit出来是5ng/ul左右.用的是maxi.
midi师姐他们做过血清.具体浓度就不太清楚了..是师姐他们的实验.~
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发表于 2015-11-9 09:32:33 | 只看该作者
张宏道 发表于 2015-11-6 13:33
一般你们是从什么样品里面抽exosome?然后比如用midi的一次能得到多少RNA啊? ...

我试过50ml尿液浓缩成3-4ml再用这个试剂盒.~RNA nanodrop 有15ng/ul吧.但是Quibit出来是5ng/ul左右.用的是maxi.
midi师姐他们做过血清.具体浓度就不太清楚了..是师姐他们的实验.~
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 楼主| 发表于 2015-11-6 13:33:14 | 只看该作者
咏咩咩 发表于 2015-11-4 21:42
我用的是这个邮箱联系的.
我师姐他们用了start kit. 觉得Qiagen提出来的质量还是不错的.
exoRNease max ...

一般你们是从什么样品里面抽exosome?然后比如用midi的一次能得到多少RNA啊?
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