超离后用SBI kit浓缩可行吗？

七七溪 · 发表于 2015-12-28 10:54:47

120ml细胞培养上清，10wg 70mims超离两次后，感觉肉眼没看到沉淀，用2mlPBS进行重悬后，打算用SBI的kit进行浓缩，这样做可行吗？有没有哪位朋友做过捏？还有是按protocal要求5:1加kit，还是按其他朋友的方法1:1加呢？

yueyujiaexo · 发表于 2016-3-23 01:58:23

感觉最难的是最后PBS冲洗用量太多，浓度都稀释了，总也达不到可以做western 的浓度

七七溪 · 发表于 2016-1-3 21:25:42

熊胖发表于 2016-1-1 23:58
超离真是难啊，能肉眼看见沉淀吗？有时超离完管壁以为是沉淀，但冲不下来，自来水清洗管子时才洗下来，不懂 ...

我也总觉得很难看到沉淀，打算再超离一次看看

熊胖 · 发表于 2016-1-1 23:58:57

超离真是难啊，能肉眼看见沉淀吗？有时超离完管壁以为是沉淀，但冲不下来，自来水清洗管子时才洗下来，不懂是沉淀还是管子离心损伤了

hzangs · 发表于 2015-12-30 15:45:46

七七溪发表于 2015-12-30 15:16
好的，谢谢师兄，我下次超离去上清的时候用移液枪吸，每次留几毫升，这样可以不？ ...

可以这样试试~

七七溪 · 发表于 2015-12-30 15:16:25

hzangs 发表于 2015-12-29 17:44
是！的！那个沉淀很容易走掉的它的个性比较倔

好的，谢谢师兄，我下次超离去上清的时候用移液枪吸，每次留几毫升，这样可以不？

hzangs · 发表于 2015-12-29 17:44:54

本帖最后由 hzangs 于 2015-12-29 17:45 编辑

七七溪发表于 2015-12-29 16:56
我也觉得是所以每次超离后都应该留下些液体吗？

是！的！那个沉淀很容易走掉的它的个性比较倔

七七溪 · 发表于 2015-12-29 16:56:17

hzangs 发表于 2015-12-29 11:36
同学，你基本上应该是在超离过程中沉淀给倒掉或者吸走了 o(╯□╰)o

我也觉得是

所以每次超离后都应该留下些液体吗？

hzangs · 发表于 2015-12-29 11:36:42

同学，你基本上应该是在超离过程中沉淀给倒掉或者吸走了 o(╯□╰)o

七七溪 · 发表于 2015-12-29 10:19:37

惜名发表于 2015-12-28 11:02
可行，但是既然超离没有沉淀，SBI也不一定有沉淀啊。。。
如果做的话，还是按照1：5来添加~ ...

啊

那我还是重新超离吧，免得浪费kit，谢谢惜名

七七溪 · 发表于 2015-12-29 10:19:05

惜名发表于 2015-12-28 11:02
可行，但是既然超离没有沉淀，SBI也不一定有沉淀啊。。。
如果做的话，还是按照1：5来添加~ ...

啊

那我还是重新超离吧，免得浪费kit，谢谢惜名

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