请教 外泌体电镜图片的问题

生物小博

大家好，我第一次打电镜，步骤是这样的取exosome 悬 液 20 μL 载 样 于 铜 网 表 面 ， 室 温 静 置 1min，用滤纸吸干液体 ；滴加磷钨酸室温复染 5 min，用滤纸从侧面小心吸干复染液。发现了一些问题，请教下大家。我采用的色谱排阻的方法分离的血清外泌体，分离后收集外泌体样品做电镜实验后发现杂质很多，[size=14.6667px]影响找外泌体视野，不知道里面的杂质都是啥。有没有可能铜网自身就带有一些杂质，还是我分离方法自身带有杂质残留到收集液中。

afra

hzangs 发表于 2016-7-16 19:58
很厉害~   我还没有挑战过自己装这个柱子  O(∩_∩)O哈哈~

你可以参考一下paper，目前有写paper会写的比 ...

请问知道那个公司有卖装好的琼脂糖凝胶柱的吗？
也打算用凝胶柱分离血清，血浆中的外泌体。
谢谢！

hzangs

生物小博 发表于 2016-7-16 09:39
对的   自己装的琼脂糖凝胶柱  我准备做个试验验证下看看空柱子洗脱的话   会不会出现这些杂质 ...

很厉害~   我还没有挑战过自己装这个柱子  O(∩_∩)O哈哈~

你可以参考一下paper，目前有写paper会写的比较清楚  说明自己是如何装柱子的

生物小博

hzangs 发表于 2016-7-15 15:07
你是自己装的柱子？     有可能会有柱材的污染，但是这个 除非柱材出来了问题 不然不应该有这么多杂质的 ...

对的   自己装的琼脂糖凝胶柱  我准备做个试验验证下看看空柱子洗脱的话   会不会出现这些杂质

hzangs

生物小博 发表于 2016-7-15 14:38
你意思是说  磷钨酸里可能带有杂质？ 我是用琼脂糖凝胶柱分离的外泌体，有没有可能凝胶有问题，我查了下 ...

你是自己装的柱子？     有可能会有柱材的污染，但是这个 除非柱材出来了问题 不然不应该有这么多杂质的

生物小博

hzangs 发表于 2016-7-15 10:20
看这个图 倒像是用高聚物沉淀下来的    杂质考虑是染料里的，参考直径和形态，基本上这个图没办法 ...

你意思是说  磷钨酸里可能带有杂质？ 我是用琼脂糖凝胶柱分离的外泌体，有没有可能凝胶有问题，我查了下凝胶是球形的，并且凝胶粒径和外泌体粒径大小差不多。会不会凝胶球残留到收集液中了

hzangs

看这个图 倒像是用高聚物沉淀下来的    杂质考虑是染料里的，参考直径和形态，基本上这个图没办法用