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外泌体电镜鉴定

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发表于 2015-2-4 11:05:09 | 只看该作者 回帖奖励 |正序浏览 |阅读模式
感觉电镜结果怪怪的,我看好多人的电镜图都是单个的,但是我的怎么是好几个在一个囊泡里面一样的,这个是外泌体么...

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 楼主| 发表于 2016-7-6 20:39:59 | 只看该作者
子非鱼 发表于 2016-5-19 15:30
你好!我也是用SBI试剂盒提取外泌体(血清和细胞的都有),做了两次TEM,聚焦不清楚,电镜老师说我制样的 ...

我的挺多外泌体的,肉眼可见沉淀,沉淀直接固定液固定的,我做的是细胞上清的(⊙o⊙)…
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 楼主| 发表于 2016-7-6 20:38:32 | 只看该作者
w403185742 发表于 2015-12-17 16:57
你好,我是初做外泌体的菜鸟,我也遇到了外泌体抱团的情况,请问这个问题你解决了吗? ...

没有解决  后来
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 楼主| 发表于 2016-7-6 20:37:56 | 只看该作者
wanghx_85 发表于 2015-10-22 23:34
我做的电镜图片和你的差不多,不过稍微好点儿,能看到单个囊泡,这应该是成团了,再提醒你一句保护好你的图 ...

好久没登了,谢谢
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发表于 2016-5-19 15:31:41 | 只看该作者
muzi.csu 发表于 2015-4-27 12:46
我是用SBI的试剂盒分离的外泌体,没做什么处理,就是分离后把固定液直接加到管子里了。 ...

话说:我两次TEM前都没固定.....不造是不是这个问题.....
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发表于 2016-5-19 15:30:36 | 只看该作者
muzi.csu 发表于 2015-4-27 12:46
我是用SBI的试剂盒分离的外泌体,没做什么处理,就是分离后把固定液直接加到管子里了。 ...

你好!我也是用SBI试剂盒提取外泌体(血清和细胞的都有),做了两次TEM,聚焦不清楚,电镜老师说我制样的问题,想和楼主交流一下:楼主用SBI提取外泌体的量有多少?固定前溶在多少的PBS里?有没有做过血清外泌体的提取,然后多少血清提取,之后多少PBS溶,TEM结果好不好?想有个漂亮的TEM图,好难啊.....
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发表于 2015-12-17 16:57:43 | 只看该作者
你好,我是初做外泌体的菜鸟,我也遇到了外泌体抱团的情况,请问这个问题你解决了吗?
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发表于 2015-11-11 22:00:52 | 只看该作者
meme 发表于 2015-10-22 15:13
你好,外泌体做电镜之前还是可以超声的呀?

可以稍微超声一下,也可以不超声。
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发表于 2015-10-22 23:34:35 | 只看该作者
我做的电镜图片和你的差不多,不过稍微好点儿,能看到单个囊泡,这应该是成团了,再提醒你一句保护好你的图片,防止被盗用
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发表于 2015-10-22 15:13:43 | 只看该作者
苏静 发表于 2015-3-4 18:40
用之前稍微超声一下会好一些

你好,外泌体做电镜之前还是可以超声的呀?
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发表于 2015-4-28 19:16:56 | 只看该作者
大师们,exosome电镜观察样本制备,看了几篇硕士论文说exosome溶解于液体后直接滴于铜网上,然后加醋酸铀染色,上机。
说的很简单哦。
可是我今天问了另外一位同学,做电镜做了一年,他是做蛋白的,他的经验是铜网最好做亲水化处理。
这一步是不是很关键啊?
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