求助！PEG聚沉--磷钨酸负染--exo电镜鉴定

zqlhiiaxyz · 发表于 2016-7-19 11:46:11

各位老师及大神们！麻烦大家帮忙看看图中红笔画出的是外泌体吗？是用PEG6000聚沉后，2%磷钨酸负染后打电镜的。谢谢大家！

hereissyk · 发表于 2018-3-18 20:53:21

有外泌体，但是由于是PEG提取的，杂质太多

shaw177 · 发表于 2018-2-2 22:22:42

mark一下

五月灼蓁 · 发表于 2017-5-15 17:33:02

zqlhiiaxyz 发表于 2016-7-28 13:24
是血清先过0.45um滤器，剩下350ul，经8%、5%PEG两次沉淀（没有超离机），40ulPBS溶的，取了其中10ul，稀释 ...

求楼主8%，5%PEG具体步骤，都是4℃过夜吗？之后用多少离心的，谢谢楼主

sunshineZY · 发表于 2017-5-1 21:20:54

求问大神外泌体电镜样本制备过程是什么？可否给我参考一下，我最近也要做。非常感谢

malingran · 发表于 2017-3-23 15:47:45

求楼主的电镜负染的protocol

子非鱼 · 发表于 2016-8-5 15:04:52

zqlhiiaxyz 发表于 2016-7-28 13:24
是血清先过0.45um滤器，剩下350ul，经8%、5%PEG两次沉淀（没有超离机），40ulPBS溶的，取了其中10ul，稀释 ...

谢谢楼主回复！！

zqlhiiaxyz · 发表于 2016-7-28 16:18:23

16gPEG+5.844g氯化钠，定容至100ml去离子水（水高压灭菌），即为16%的PEG液

小孔加油 · 发表于 2016-7-28 15:15:44

楼主，请问您是PEG6000怎么提取外泌体，有没有protocol提供？现在刚买回PEG6000粉末，不知道怎么配制

zqlhiiaxyz · 发表于 2016-7-28 13:24:48

是血清先过0.45um滤器，剩下350ul，经8%、5%PEG两次沉淀（没有超离机），40ulPBS溶的，取了其中10ul，稀释了5-10倍打的。我这个也很不好，背景太复杂了!

子非鱼 · 发表于 2016-7-26 16:08:08

本帖最后由子非鱼于 2016-7-26 16:12 编辑

zqlhiiaxyz 发表于 2016-7-25 19:40
非常感谢大家的回复！
@子非鱼是提取的血清的。没经过超离，PEG聚沉后，PBS稀释后打的 ...

谢谢楼主回复！我还想继续问：楼主是8%的PEG6000聚沉吗？多少血清提取的exo，PEG聚沉了几次？多少PBS溶解上的电镜？我也做血清，做了两次电镜都不好，想从楼主这取点经！

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