有人做过细胞的Alix免疫荧光吗？

sldingxiang · 发表于 2016-7-29 09:12:17

求教各位大神，想检测细胞的外泌体的分泌，做了细胞的Alix免疫荧光，如果细胞内的Alix多，是不是能间接说明细胞分泌的外泌体少？

hzangs · 发表于 2016-7-29 22:34:58

答：不能

sldingxiang · 发表于 2016-7-30 09:24:13

hzangs 发表于 2016-7-29 22:34
答：不能

咱们园子里之前推荐过一篇文章：The potential of endurance exercise-derived exosomes to treat metabolic diseases. Nat Rev Endocrinol. IF: 13.28。讲的是耐力运动可强度依赖性地增加循环中的外泌体，其中有张图片就是做的肌肉组织的Alix的免疫荧光，静止状态下肌纤维中Alix多，运动后肌纤维中Alix明显减少了。亲你怎么看？

hzangs · 发表于 2016-7-30 11:31:14

本帖最后由 hzangs 于 2016-7-31 12:33 编辑

sldingxiang 发表于 2016-7-30 09:24
咱们园子里之前推荐过一篇文章：The potential of endurance exercise-derived exosomes to treat metabo ...

如果仅仅有这一个数据，我的答案依旧是：不能

科研是一个要重复论证的过程，看到 1*3，就是看到了1*3，不能想当然的认为那个* 隐藏的就是2。相信这篇paper里也有用其他的证据来证明他们的结论。
如果你可以通过其他手段证明同样的结果，我可以认可这个方法一定程度上反映了囊泡的释放量。但如果其他的都不做，就单纯IF检测一下ALIX在不同细胞的水平就说囊泡释放量不同， sorry 我不敢苟同

IF发现ALIX的丰度下去了，可能是ALIX基因表达水平下去了，或者是ALIX蛋白稳定性下降造成的蛋白水平下降，所以需要用其他实验来共同佐证，而不能单靠一个实验来证明。

sldingxiang · 发表于 2016-7-31 10:00:52

hzangs 发表于 2016-7-30 11:31
如果仅仅有这一个数据，我的答案依旧是：不能

科研是一个要重复论证的过程，看到 1*3，就是 ...

多谢hzangs版主受教了~

ding29 · 发表于 2020-7-2 16:41:42

hzangs 发表于 2016-7-30 11:31
如果仅仅有这一个数据，我的答案依旧是：不能

科研是一个要重复论证的过程，看到 1*3，就是看 ...

可否请教大神，在研究外泌体释放的文章中，常用的一个方法是在细胞内染ALIX标记MVB及ILV，如下图，他们的统计量用的是ALIX positive vesicles per cell，想请问这是要计算每个细胞内ALIX荧光颗粒数吗？这和免疫荧光强度的方法或意义是否一样呢？盼复，谢谢！

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