请教大家超离第一次后是否会用PBS洗涤外泌体，如何洗涤

爱学习 · 发表于 2018-11-13 21:05:08

RT。
有人建议先用大的超离管离，再用小超离管加大离心力，浓缩。

hzangs · 发表于 2018-11-13 21:27:43

加PBS 加满超离管。然后再超离一次。然后弃PBS 底部留一点重悬外泌体

爱学习 · 发表于 2018-11-14 20:58:34

hzangs 发表于 2018-11-13 21:27
加PBS 加满超离管。然后再超离一次。然后弃PBS 底部留一点重悬外泌体

有前辈的建议是，第二次用PBS洗涤的时候应该转移到更小的离心管，加大离心力并且延长离心时间，这样能起到浓缩的作用，不知道您的观点如何？

爱学习 · 发表于 2018-11-14 20:59:48

hzangs 发表于 2018-11-13 21:27
加PBS 加满超离管。然后再超离一次。然后弃PBS 底部留一点重悬外泌体

弃PBS是用倒的还是用吸的呢

hzangs · 发表于 2018-11-15 11:46:15

爱学习发表于 2018-11-14 20:59
弃PBS是用倒的还是用吸的呢

吸。

hzangs · 发表于 2018-11-15 11:46:35

爱学习发表于 2018-11-14 20:58
有前辈的建议是，第二次用PBS洗涤的时候应该转移到更小的离心管，加大离心力并且延长离心时间，这样能起 ...

最好要缩小体积

爱学习 · 发表于 2018-11-18 19:34:43

hzangs 发表于 2018-11-15 11:46
吸。

发现一个很震惊的结果，PBS洗之前的重悬的东西，BCA测浓度稀释了五倍还是超过上限500ug/ul，但是PBS洗了之后重悬，测出来浓度不到50ug/ul.所以那么高的浓度，其实都是蛋白杂质喽？

小柠檬 · 发表于 2019-3-6 10:41:40

hzangs 发表于 2018-11-13 21:27
加PBS 加满超离管。然后再超离一次。然后弃PBS 底部留一点重悬外泌体

您好，请问再一次超离的离心力和时间是多少？

hzangs · 发表于 2019-3-6 17:42:38

爱学习发表于 2018-11-18 19:34
发现一个很震惊的结果，PBS洗之前的重悬的东西，BCA测浓度稀释了五倍还是超过上限500ug/ul，但是PBS洗了 ...

对

hzangs · 发表于 2019-3-6 17:42:54

小柠檬发表于 2019-3-6 10:41
您好，请问再一次超离的离心力和时间是多少？

110000g 70min

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