小白请问10万g第一次离心后，吸上清该怎么操作？

出尘7 · 发表于 2019-5-11 17:18:22

小白请问10万g第一次离心后，吸上清该怎么操作？还望各位大神指教一下！

论坛里大佬都说用吸，所以我上次超离之后，选择用1ml的枪头吸上清，吸到最后的时候小心翼翼但是还是感觉把外泌体吸走了，这次做wb并没有做出来，感觉不如一次性倒处理的好。现在特别想问问大家这个吸的操作到底怎么进行，使用1ml的枪吸还是用10ml的移液管吸？我的离心管大小是38.5ml的。底部该留多少液体呢??1ml还是200ul？求大神解答！

出尘7 · 发表于 2019-5-11 18:02:50

坐等大神回答

hzangs · 发表于 2019-5-12 16:51:15

出尘7 发表于 2019-5-11 18:02
坐等大神回答

建议大家是从上面吸。但是如果你倒也可以做出来。那就没必要必须从上面吸啦

出尘7 · 发表于 2019-5-13 14:06:34

hzangs 发表于 2019-5-12 16:51
建议大家是从上面吸。但是如果你倒也可以做出来。那就没必要必须从上面吸啦 ...

大神，是用1ml的枪吸还是用10ml的移液管吸？感觉大枪的吸力比倒的吸力还大。。。

exo-wang · 发表于 2019-5-22 16:19:14

hzangs 发表于 2019-5-12 16:51
建议大家是从上面吸。但是如果你倒也可以做出来。那就没必要必须从上面吸啦 ...

请大神指教，离心3小时会不会太久，上次离心了3小时沉淀倒是很多，但是不能完全溶于PBS，蛋白浓度低，颗粒浓度不高，CD63的western条带也很弱，但是沉淀的条带里CD63比较强

，请问你遇到过沉淀不溶的情况吗？有什么处理方法不？

hzangs · 发表于 2019-5-22 19:08:17

exo-wang 发表于 2019-5-22 16:19
请大神指教，离心3小时会不会太久，上次离心了3小时沉淀倒是很多，但是不能完全溶于PBS，蛋白浓度低，颗 ...

如果你是正常的培养液体系，基本上10万g 70min 就够了。如果沉淀不容可能是离心下来了一些杂质。降低时间

exo-wang · 发表于 2019-5-23 14:27:34

hzangs 发表于 2019-5-22 19:08
如果你是正常的培养液体系，基本上10万g 70min 就够了。如果沉淀不容可能是离心下来了一些杂质。 ...

好的，我再做一下看，谢谢大神

425612liyuan · 发表于 2019-7-18 13:17:57

请问有BCA法测外泌体的步骤吗

zhangchao · 发表于 2020-7-19 23:03:56

425612liyuan 发表于 2019-7-18 13:17
请问有BCA法测外泌体的步骤吗

请问你有BCA测外泌体的具体步骤了么？

奥之 · 发表于 2020-7-28 09:58:19

请问贝克曼超离机10万g对应多少rpm?

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小白请问10万g第一次离心后，吸上清该怎么操作？

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