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外泌体是否要加裂解液

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楼主

发表于 2019-7-21 16:46:51 | 只看该作者回帖奖励

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最近在做WB，一直有个疑问，提取的外泌体在做WB前要不要加裂解液？看了有人说按1:1的比例加裂解液然后再加lading buffer的，比如我要10ul的外泌体做，那不是要加10ul的裂解液，这样会把外泌体稀释吗？而且WB每孔的上样量最大不超过20ul，我还要加loading buffer，岂不是超过了

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沙发

发表于 2019-7-26 15:05:30 | 只看该作者

我是加了裂解液的

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楼主| 发表于 2019-8-5 14:26:30 | 只看该作者

邱邱-- 发表于 2019-7-26 15:05
我是加了裂解液的

效果怎样呢

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地板

发表于 2019-8-21 17:20:30 | 只看该作者

同问看有人说加裂解液和不加裂解液都可以，想问俩种跑WB有什么区别

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5^#

发表于 2019-8-26 10:46:29 | 只看该作者

桃花灼灼发表于 2019-8-5 14:26
效果怎样呢

做鉴定是跑出来了但蛋白浓度不高

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6^#

发表于 2019-9-2 11:31:32 | 只看该作者

我的也是，跑不出条带

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7^#

发表于 2020-7-9 18:06:33 | 只看该作者

你好，请问外泌体的裂解你是怎么配制的呀

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8^#

发表于 2020-7-9 18:07:15 | 只看该作者

邱邱-- 发表于 2019-7-26 15:05
我是加了裂解液的

你好，请问外泌体的裂解你是怎么配制的呀

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9^#

发表于 2020-9-29 09:06:36 | 只看该作者

就是普通的蛋白裂解液RIPA+PMSF(1:100)

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10^#

发表于 2021-6-9 20:58:43 | 只看该作者

加了，做不出，好像最少浓度要达到2ug/ml

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