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血清外泌体超离方法

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楼主
发表于 2019-9-6 18:48:54 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
        想向大家求教一下外泌体超离的具体方法,我的步骤是2000g 20min 10000g 1h,0.22滤膜过滤,之后上110000g 2h,吸走上清剩0.5cm,加pbs重悬后110000g 2h,之后用30ulpbs重悬,用的是10.5ml离心管,测出来的浓度大概0.5-3ug/ul,可是wb跑不出来,做了电镜整个视野才找到俩囊泡,重复了有7、8次了也没找到原因,不知道为啥得率这么低,对了,我用的是类风湿关节炎的血清5-6ml,感觉要废,请求帮助

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沙发
发表于 2019-10-9 14:25:06 | 只看该作者
请问怎么在血清中提取特定细胞的外泌体,谢谢
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板凳
发表于 2019-10-28 10:18:18 | 只看该作者
找到原因了么
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地板
发表于 2020-7-19 23:13:23 | 只看该作者
请问你解决了么问题?
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发表于 2020-7-28 09:57:14 | 只看该作者
请问贝克曼超离机100000g对应多少rpm?
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发表于 2020-7-28 11:29:47 | 只看该作者
有篇nature的文章,稀释45倍后15,0000g超离过夜,然后PBS重选15,0000g 超离2h再收集,我用这个方法做wb可以检测到,具体可以看看那篇文章Nature 2015 Glypican1 identifies cancer exosomes and facilitates early detection of cancer

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