【Nature】：外泌体（exosome）整合素与肿瘤转移器官...

Johnny

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exosomes相关研究，又一力作。

Nature：外泌体（exosome）整合素分子决定了肿瘤转移的器官倾向性

        自从1889年Stephen Paget提出假说，转移的器官倾向性依然是肿瘤最大的谜团之一。来自康奈尔大学的研究人员David Lyden等在Nature发表文章揭示了来自小鼠和人的肺、肝、脑等器官倾向性的肿瘤细胞外泌体倾向于与它们预计转移的目的器官的细胞（肺纤维细胞和上皮细胞、肝的kupffer细胞和脑的内皮细胞）相结合。研究表明被特定器官的细胞获取的肿瘤外泌体可为肿瘤的转移准备转移前微环境。用肺转倾向的肿瘤细胞来源的外泌体处理小鼠后可是骨转倾向的肿瘤细胞重新定向。外泌体的蛋白质组学分析发现不同器官倾向性的肿瘤细胞来源的外泌体具有不同的整合素（integrin）表达谱，整合素α6β4和α6β1与肺转有关，而整合素αvβ5与肝转有关。Knock down整合素α6β4和αvβ5可减少外泌体被靶器官细胞获取，进而分别降低了肺和肝的转移。进一步研究发现外泌体整合素被细胞获取后激活了Src的磷酸化和促炎的S100基因的表达。最后通过临床数据分析显示外泌体整合素和作为预测肿瘤转移的器官倾向性的诊断指标。

Hoshino, A., et al. (2015)."Tumourexosome integrins determine organotropic metastasis." Natureadvanceonline publication.

                Eversince Stephen Paget’s 1889 hypothesis, metastatic organotropism has remainedone of cancer’s greatest mysteries. Here we demonstrate that exosomes frommouse and human lung-, liver- and brain-tropic tumour cells fuse preferentiallywith resident cells at their predicted destination, namely lung fibroblasts andepithelial cells, liver Kupffer cells and brain endothelial cells. We show thattumour-derived exosomesuptaken by organ-specific cells prepare thepre-metastatic niche. Treatment with exosomes from lung-tropic modelsredirected the metastasis of bone-tropic tumour cells. Exosome proteomicsrevealed distinct integrin expression patterns, in which the exosomalintegrinsα6β4 and α6β1 were associated with lung metastasis, while exosomal integrin αvβ5was linked to liver metastasis. Targeting the integrins α6β4 and αvβ5 decreasedexosome uptake, as well as lung and liver metastasis, respectively. Wedemonstrate that exosome integrin uptake by resident cells activates Srcphosphorylation and pro-inflammatory S100 gene expression. Finally, ourclinical data indicate that exosomalintegrins could be used to predictorgan-specific metastasis.

jp3266726

感觉这篇文章会引起轩然大波

咏咩咩

最近都两篇exosome发在nature了..

惜名

精读文献如下：

第一步：figure1和extended figure1
提取几种肿瘤细胞系的exo，用近红外线（NIR）/红色荧光标记，然后retro-orbitally注射至裸鼠，观察体内分布。
结果发现，具有肺脏转移倾向的cell分泌的exo更容易被肺脏摄取，具有肝脏转移特性的cell分泌的exo更容易被肝脏摄取。
接下来验证了其他一些细胞系，进一步证实上述发现。

第二步：
1、用FM1-43标记exo，注射至小鼠，用电镜观察，这些被标记的exo的确可以在肺部被摄取。感觉FM1-43是一种可以在电镜下观察的高密度、圆形小黑点。
2、连续3天注射NIR标记的exo，发现肺部聚集的信号增强。说明联系注射exo具有累积效应。
3、隔日注射exo，联系3周。然后再注射cell，发现exo处理过的小鼠更易发生肿瘤转移。

第三步：
对这些不同细胞系来源的exo进行质谱分析，发现了6种整合素。并且进一步各种分析，发现不同转移特性的cell-exo，表达不同的整合素。

第四步：
1、注射exo，24小时后，发现可以导致血管leakiness增加。
2、不同来源的exo，会被不同组织的不同基质细胞摄取。和上文发现的exo的组织特异性聚集相吻合。
3、作者认为，exo的组织特异性聚集是由整合素与ECM（细胞相关细胞外基质）的作用导致的。

第五步：
1、敲除相应的整合素、或用蛋白中和掉这些整合素，发现exo在体内的特异性组织富集程度明显下降。值得一提的是（extended figure 6b），整合素中和蛋白（HYD-1）还可以在in vitro水平抑制细胞对exo的摄取（不过我看给出的figure真心不能说明这一点啊。。。）。过表达整合素可以促进exo的组织的聚集。
2、敲除相应整合素，发现肿瘤细胞的转移能力减弱。

第六步：
整合素可以诱导一些促转移的基因激活，改变组织微环境，导致肿瘤转移的发生。

第七步：
在小鼠、人肿瘤患者，发现具有肿瘤转移倾向、或已经转移，其血清中相应整合素增高。因此作者认为exo整合素可以作为肿瘤是否有转移倾向的指标。

exosome技术处理：
注射：眼部、尾静脉、心内注射，发现exo的体内分布相似。除了脑部，脑部似乎采用眼静脉窦更好。
染色：cell、体内切片染色，用PKH26/67；小鼠大体成像，采用near infrared染色？？？（我也不确定）

Johnny

惜名 发表于 2015-11-1 10:21
精读文献如下：

第一步：figure1和extended figure1

微兄 棒棒哒 ~~~~~~~~~

nene

求原文pdf

yy8651

原文在此--评论
额，原文太大传不上去

yy8651

惜名 发表于 2015-11-1 10:21
精读文献如下：

第一步：figure1和extended figure1

版主啊，我看了我的文件上传权限应该是单个文件不超过19M啊，但是这个全文只有7M多，我就是上传不了，说服务器限制，我传的文件太大。麻烦给看看咋回事，我好把全文传上来

wooway

yy8651 发表于 2015-11-1 23:40
版主啊，我看了我的文件上传权限应该是单个文件不超过19M啊，但是这个全文只有7M多，我就是上传不了，说 ...

发我邮箱呗！三克油，510175804@qq.com

yzphx

yy8651 发表于 2015-11-1 23:40
版主啊，我看了我的文件上传权限应该是单个文件不超过19M啊，但是这个全文只有7M多，我就是上传不了，说 ...

你好，可以把【Nature】：外泌体整合素与肿瘤转移器官这篇文献发到我的邮箱吗？我很想看看，但就是下不了。yzphx1990@163.com。非常感谢。