wb问题求指导

qifeng2014

CD63抗体做出来，条带跟分子量对不上，我做到了25左右，而且在25左右是非常特异的单一条带，已经重复，为什么53没有呢？
看到一篇文献，里面有一张图，有几句话in fact, the molecular weight of CD63 has been observed to be 32, 35, or 50 kDa with N-linked glycosylation in western blotting experiments, although the predicted molecular weight of CD63 is 25 kDa。然后在相应的查询蛋白分子量的网站上也提到了CD63的三种剪接体。这些怎么解释呢

hzangs

in fact, the molecular weight of CD63 has been observed to be 32, 35, or 50 kDa with N-linked glycosylation in western blotting experiments, although the predicted molecular weight of CD63 is 25 kDa。

翻译一下： 事实上，虽然CD63测算出来的分子量是25KDa，但是由于N端的糖基化，（我们）WB实验中检测到的CD63在32,35 或者 50  kDa处。

ps：我没杂过CD63 ，但是看这句话的意思， 作者在解释自己的WB结果为什么没有在25KDa的位置。   估计你的25KDa的位置是对的。
坐看杂过CD63的孩子发言。

qifeng2014

hzangs 发表于 2016-1-7 17:07
in fact, the molecular weight of CD63 has been observed to be 32, 35, or 50 kDa with N-linked glycos ...

那篇文章的作者做出了三个分子量的CD63，可以看我发的那张图的D图，我就是很奇怪一点，为什么很多文献里都只提到了53的CD63，难道他们都没有遇到这种情况。

hzangs

qifeng2014 发表于 2016-1-7 20:15
那篇文章的作者做出了三个分子量的CD63，可以看我发的那张图的D图，我就是很奇怪一点，为什么很多文献里 ...

你懂的， o(╯□╰)o    多一事不如少一事。   reviewer 不argue   何必要自己提出来。。。

我没杂过CD63   等等看  其他杂过CD63的孩子    怎么评论吧

张宏道

CD63好像就是这样，一般情况下由于N端的修饰导致蛋白大小有差距，很难做到与预测的25kD一样大，我看了挺多杂CD63的文章，大部分western图都是很长的一条带。各个公司的CD63抗体，在不同细胞的裂解物杂出的大小也不尽相同。感觉在这个范围内有带都是可以接受的。

wjy

我的CD63抗体都是在50KD左右，还没有出现过25kd的条带那

wangjoseph

俺的CD63是30-60kDa 模糊带， 加DTT, 并煮过

xinyi717

可以请问下楼主选用的cd63抗体的货号咩？谢谢

子非鱼

楼主，这篇文献题目是什么，想搜来看看

t0xiao01

同求文献