PKH67染色

惜名

yuantingdong 发表于 2016-10-17 14:41
惜名兄，我查看SBI说明书，步骤跟你说的不一样，为何你的是4度静置40-60min,然后12000*4min离心。谢谢。
...

静置40-60min是因为我浓缩以后，体积很小了，只要半个多小时就可以。如果你是10ml的体积，还是要过夜的

小七果果8

惜名 发表于 2015-9-16 14:44
可以。
我就是这么干的。

求荧光标记后，不用超速离心，再次用EXOquick的具体步骤~谢啦!!☆⌒(*＾-゜)v

小七果果8

惜名 发表于 2015-9-16 14:44
可以。
我就是这么干的。

请问惜名前辈，荧光标记，BSA终止标记后需要加多少PBS，然后再用EXOquick啊？老害怕提两次，会有很多杂质，而且多余的荧光会不会干扰BCA蛋白测定结果呢？

惜名

小七果果8 发表于 2016-10-22 16:09
请问惜名前辈，荧光标记，BSA终止标记后需要加多少PBS，然后再用EXOquick啊？老害怕提两次，会有很多杂质 ...

不用加PBS了啊。。。我直接加exoquick然后静置、离心的。。。但是，有时看不到沉淀，感觉不是很稳定~
多余的荧光染料估计很难避免，所以如果能用超离是最好的。试剂盒总是存在各种污染的问题

小七果果8

惜名 发表于 2016-10-22 20:38
不用加PBS了啊。。。我直接加exoquick然后静置、离心的。。。但是，有时看不到沉淀，感觉不是很稳定~
多 ...

之前用BSA终止标记，14000g离心2h后并没有发现什么沉淀，测BCA含量很低，这次没有用超速离心，是标记后又加了次exoquick，1500g 30min，测BCA浓度3000微克/ml，感觉这次提出来浓度太高，害怕是杂质……对了前辈，用100000g超离会不会损伤外泌体活性，因为我打算做的是动物实验，求指导~

xixihaha

宋老师，给我发一份PKH染色的步骤，谢谢！815018560@qq.com

dancing

惜名 发表于 2015-8-22 10:15
是时候亮出这篇文献了：Cardiac fibroblast-derived microRNA passenger strand-enriched exosomes mediate ...

请问外泌体染色之后直接跟细胞一起培养吗，细胞要怎么染色？

destiny

宋梦阳 发表于 2015-10-13 11:19
我发现我现在是加了1ul的PKH67与750ul的Diluent C混合，然后EXO与250ul Diluent Ca混合，这样很节省，效果 ...

宋老师，麻烦您给我发一份PKH67染色步骤和相关文献吧，非常感谢，好人一生平安，59418976@qq.com。

玉帝小儿

宋梦阳 发表于 2015-10-13 11:19
我发现我现在是加了1ul的PKH67与750ul的Diluent C混合，然后EXO与250ul Diluent Ca混合，这样很节省，效果 ...

求pkh67染色具体方法，谢谢。553926837@qq.com

Marvel

大神，同求exosomes染色步骤一份  753262246@qq.com  跪谢、、。