想统计下大家用超速离心时一次用多少量的细胞上清才够用

teddy溶溶 · 发表于 2018-10-25 15:15:44

看了好多人反应包括测序公司都说细胞上清提取出的exo量少的可怜，我这次决定用20以上个培养皿收集。请问大家除了电镜和蛋白鉴定法，还有什么方法能快速省钱检验自己提出来的是外泌体呢？

hzangs · 发表于 2018-11-7 12:03:23

teddy溶溶发表于 2018-10-25 15:15
看了好多人反应包括测序公司都说细胞上清提取出的exo量少的可怜，我这次决定用20以上个培养皿收集。请问大 ...

木有。一般杂WB是最快的方法……当然如果你可以随时打电镜的话电镜最快

cecily001 · 发表于 2018-11-14 13:41:49

我做电镜的细胞上清一般至少都提50mL的

alex · 发表于 2018-11-15 15:28:15

100ml够吗?

出尘7 · 发表于 2018-12-28 16:20:17

没用两个T75板的上清，

桃花灼灼 · 发表于 2019-1-14 09:16:04

本人刚开始做外泌体，请教一下楼里的大神们，我的细胞已经在6孔板里长了五天，第三天的时候密度已经90%了，还能处理后收集细胞上清液吗？会不会细胞老化了，分泌外泌体就少了啊

bokelu · 发表于 2019-3-18 09:42:53

teddy溶溶发表于 2018-10-25 15:15
看了好多人反应包括测序公司都说细胞上清提取出的exo量少的可怜，我这次决定用20以上个培养皿收集。请问大 ...

使用NTA测量粒子大小，我们就是这么做的。测量出来的粒子体积在50nm-200nm之间，峰值为100nm，90百分位数的时候体积是132，基本都是在外泌体那个体积之内。

邱邱-- · 发表于 2019-3-27 10:10:44

我是用的超滤管浓缩后再用试剂提取的，有人用过吗？效果如何

邱邱-- · 发表于 2019-3-27 12:10:53

bobo 发表于 2015-5-26 10:25
我想用试剂盒提exosome,那么如何将100ml的细胞培养液浓缩到4ml,从而使培养液中的exosome浓度大些 ...

你做的效果怎么样

邱邱-- · 发表于 2019-3-27 12:21:34

wwpapple 发表于 2018-8-14 11:28
想请教一下，因为实验室没有超高速离心机，用试剂盒提取外泌体的话，提取的量够后续转染或者共培养实验吗？ ...

请问你之后是怎么解决的？

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