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楼主: hzangs
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PEG聚沉+超速离心 试用报告 :Sci Rep文章技术重复

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发表于 2016-11-14 15:12:28 | 只看该作者
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发表于 2016-11-22 21:42:35 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-4-27 16:54
你用 巨噬细胞  或者 胰腺癌细胞 就知道了   那产量,简直是细胞把自己粉碎了 然后往外吐 exosome啊! ...

哈哈哈,你好逗
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发表于 2016-11-22 21:49:12 | 只看该作者
这样的方法能提高产量吗?
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发表于 2016-12-12 12:20:40 | 只看该作者
急问,弱弱问,PEG可以高温湿热灭菌吗?看到楼主是用filter灭菌的
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 楼主| 发表于 2016-12-12 12:23:41 | 只看该作者
nene 发表于 2016-12-12 12:20
急问,弱弱问,PEG可以高温湿热灭菌吗?看到楼主是用filter灭菌的

这个好像不行,看一些网上的说法  高温高压可能会使大分子PGE链变短。先将水灭菌,然后配置PEG    之后用0.45的过滤 是可以的。
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发表于 2016-12-12 12:35:42 | 只看该作者
谢楼主!马上用的话,不灭菌如何呢?
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 楼主| 发表于 2016-12-12 22:32:03 | 只看该作者
nene 发表于 2016-12-12 12:35
谢楼主!马上用的话,不灭菌如何呢?

分子实验可以,但是细胞实验的话 很容易污染~
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发表于 2017-1-12 16:32:38 | 只看该作者
本帖最后由 shinerow 于 2017-1-13 08:46 编辑
hzangs 发表于 2016-4-26 21:19
是的。  cell1 超离分离的时候出了点问题,没有收到……

ALIX是CST的  CD63 来自proteintech.  ...

楼主快看到我!CD63楼主做WB出来的条带是多大啊!根据楼主的推荐买了这两个抗体,CD63出来好多条带,ALIX做不出来。。。。还有为什么proteintech官网上的CD63做WB条带说是33KD,但是别的公司大多都是53KD呢~~~
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发表于 2017-1-18 10:20:50 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-4-27 17:46
PEG+超速离心清洗  这个方法还可以。
如果你用一个十几毫升或者几十毫升PBS的体系进行清洗这一步的话,结 ...

请问你说的是超离后用十几毫升的PBS重悬吗?我也是这个方法,WB跑的结果不好,我是血清外泌体跑的CD9
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发表于 2017-1-18 10:24:00 | 只看该作者
lenoch 发表于 2016-5-11 12:49
我用的是0.22的,个人感觉会使exosome更纯一些,至少220nm以上的都滤掉了。会使你的电镜和nanosight更好 ...

群主,请问你在哪个城市,我想问问哪有nanosight
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