PEG聚沉+超速离心试用报告：Sci Rep文章技术重复

dangerous517 · 发表于 2017-3-27 21:02:16

版主好人，请问我想用提取出来的exo处理细胞，那么是将exo混入普通完全培养基去共培养细胞，还是把exo混入无外泌体培养基去处理细胞？好人平安

hzangs · 发表于 2017-3-27 21:04:13

dangerous517 发表于 2017-3-27 21:02
版主好人，请问我想用提取出来的exo处理细胞，那么是将exo混入普通完全培养基去共培养细胞，还是把exo混入 ...

这个无所谓的。都可以。只要做好严格的对照即可。

xiaojinyuhen · 发表于 2017-3-31 11:36:44

版主您好，请问我WB跑的细胞裂解蛋白和EXO的CD63是齐的一条带，已经BCA定量到相同蛋白上样量，请问这种情况正常吗，为什么细胞中也能跑出和EXO一样的CD63

hzangs · 发表于 2017-3-31 13:55:06

本帖最后由 hzangs 于 2017-3-31 13:58 编辑

xiaojinyuhen 发表于 2017-3-31 11:36
版主您好，请问我WB跑的细胞裂解蛋白和EXO的CD63是齐的一条带，已经BCA定量到相同蛋白上样量，请问这种情 ...

沉淀试剂盒提取的外泌体吧？

xiaojinyuhen · 发表于 2017-3-31 14:16:52

hzangs 发表于 2017-3-31 13:55
沉淀试剂盒提取的外泌体吧？

不是唉，就是按本文中您的方法，PEG+超离，提取了大约100ml的培液才保证了上样量，每孔20微克蛋白，但是我跑出来CD63的WB，细胞和外泌体的样本都是齐的，没有出现外泌体高于细胞的情况

hzangs · 发表于 2017-3-31 17:21:35

xiaojinyuhen 发表于 2017-3-31 14:16
不是唉，就是按本文中您的方法，PEG+超离，提取了大约100ml的培液才保证了上样量，每孔20微克蛋白，但是 ...

那应该是实验过程中出错了。这个方法其实和沉淀试剂盒一样。
你下次尝试 PEG 设置一组WB 然后PEG+超离设置一组WB cell裂解一组。这样看看能知道是不是你在超离清洗的时候洗丢了

william · 发表于 2017-3-31 22:39:26

留存，谢谢！

Exosomeslover · 发表于 2017-4-25 12:27:39

楼主，有个问题想请教，提取外泌体用的上清培液，你们是怎么制备的呢？超离么？还需要加什么其他的营养物质么

范范 · 发表于 2017-4-30 21:07:12

请问楼主最后一步不超离效果是不是和试剂盒效果是一样的，如果不超离做出来的WB和电镜结果可以用吗，谢谢啦。

hzangs · 发表于 2017-5-2 14:14:39

范范发表于 2017-4-30 21:07
请问楼主最后一步不超离效果是不是和试剂盒效果是一样的，如果不超离做出来的WB和电镜结果可以用吗，谢谢啦 ...

是的。至于能不能用，要看你图片质量的。

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PEG聚沉+超速离心 试用报告 ：Sci Rep文章技术重复