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楼主: hzangs
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PEG聚沉+超速离心 试用报告 :Sci Rep文章技术重复

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发表于 2017-5-2 17:17:06 | 只看该作者
楼主,请问提过尿液中的外泌体吗?我用超离做的,最后管底看不到沉淀。。。
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 楼主| 发表于 2017-5-3 09:42:01 | 只看该作者
丫丫 发表于 2017-5-2 17:17
楼主,请问提过尿液中的外泌体吗?我用超离做的,最后管底看不到沉淀。。。 ...

没有这方面的经验。恕我无能为力
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发表于 2017-5-9 16:13:58 | 只看该作者
请问下楼主,一般用多少培养液提取外泌体
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 楼主| 发表于 2017-5-9 17:50:10 | 只看该作者
五月灼蓁 发表于 2017-5-9 16:13
请问下楼主,一般用多少培养液提取外泌体

一般80ml左右
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发表于 2017-5-9 18:19:12 | 只看该作者

谢谢楼主
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发表于 2017-5-25 11:20:55 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-5-8 15:52
额    这个已经很明显了。  如果你用经典的超离方法,沉淀基本照片是看不到的 ...

群主,沉淀看不到的话就只能取管底的上清液了是吗?还有就是我有一个问题尽管看到了好多沉淀(我用了170毫升左右的培基),但是用马尔文的ZS来测粒径,峰值在250nm左右,不知道是差速离心出了问题,还是粒径仪的问题,感觉心都要碎了。
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发表于 2017-5-25 11:23:11 | 只看该作者
lenoch 发表于 2016-5-11 12:49
我用的是0.22的,个人感觉会使exosome更纯一些,至少220nm以上的都滤掉了。会使你的电镜和nanosight更好 ...

同样用0.22 微米过滤过,但是测粒径峰值还是在250-300nm,不知道是哪里出了问题
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发表于 2017-5-31 10:38:48 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-4-26 21:20
混匀 然后静静的放着,静静会帮你的

请问 为什么要放4度反应呢?37度或者常温反应可以吗?
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发表于 2017-6-19 16:15:35 | 只看该作者
yulia 发表于 2016-5-13 16:59
怎么去掉exosome?有专门无exosome的血清卖吗?

有  超贵
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发表于 2017-6-19 16:24:34 来自手机 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-4-27 17:46
PEG+超速离心清洗  这个方法还可以。
如果你用一个十几毫升或者几十毫升PBS的体系进行清洗这一步的话,结 ...

您的意思是最后清洗这一步可以用十几毫升的PBS来代替超速离心吗?因为实验室没有超速离心机,所以这一步挺纠结的。
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