PEG聚沉+超速离心试用报告：Sci Rep文章技术重复

Exosomeslover · 发表于 2017-4-25 12:27:39

楼主，有个问题想请教，提取外泌体用的上清培液，你们是怎么制备的呢？超离么？还需要加什么其他的营养物质么

范范 · 发表于 2017-4-30 21:07:12

请问楼主最后一步不超离效果是不是和试剂盒效果是一样的，如果不超离做出来的WB和电镜结果可以用吗，谢谢啦。

hzangs · 发表于 2017-5-2 14:14:39

范范发表于 2017-4-30 21:07
请问楼主最后一步不超离效果是不是和试剂盒效果是一样的，如果不超离做出来的WB和电镜结果可以用吗，谢谢啦 ...

是的。至于能不能用，要看你图片质量的。

丫丫 · 发表于 2017-5-2 17:17:06

楼主，请问提过尿液中的外泌体吗？我用超离做的，最后管底看不到沉淀。。。

hzangs · 发表于 2017-5-3 09:42:01

丫丫发表于 2017-5-2 17:17
楼主，请问提过尿液中的外泌体吗？我用超离做的，最后管底看不到沉淀。。。 ...

没有这方面的经验。恕我无能为力

五月灼蓁 · 发表于 2017-5-9 16:13:58

请问下楼主，一般用多少培养液提取外泌体

hzangs · 发表于 2017-5-9 17:50:10

五月灼蓁发表于 2017-5-9 16:13
请问下楼主，一般用多少培养液提取外泌体

一般80ml左右

五月灼蓁 · 发表于 2017-5-9 18:19:12

hzangs 发表于 2017-5-9 17:50
一般80ml左右

谢谢楼主

malingran · 发表于 2017-5-25 11:20:55

hzangs 发表于 2016-5-8 15:52
额这个已经很明显了。如果你用经典的超离方法，沉淀基本照片是看不到的 ...

群主，沉淀看不到的话就只能取管底的上清液了是吗？还有就是我有一个问题尽管看到了好多沉淀（我用了170毫升左右的培基），但是用马尔文的ZS来测粒径，峰值在250nm左右，不知道是差速离心出了问题，还是粒径仪的问题，感觉心都要碎了。

malingran · 发表于 2017-5-25 11:23:11

lenoch 发表于 2016-5-11 12:49
我用的是0.22的，个人感觉会使exosome更纯一些，至少220nm以上的都滤掉了。会使你的电镜和nanosight更好 ...

同样用0.22 微米过滤过，但是测粒径峰值还是在250-300nm，不知道是哪里出了问题

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