SBI试剂盒提取培养液及血清外泌体protocol

cluo83

yuantingdong 发表于 2016-10-27 16:12
恩，我觉得应该可以，本来超离就有这一步嘛，我后续也加了过滤。你做了没？效果如何？谢谢 ...

我还没做，我因为RNA和蛋白都要分析，又是血浆样本，但不想用超离，所以还没选好用那种方法。SBI的总觉得沉淀下来的会有大量杂蛋白吧。。

芮苏遥

yuantingdong 发表于 2016-10-27 16:14
我用培养液15ml，提出来沉淀挺多的，不过还没鉴定，怎么看到底纯不纯呢？ ...

CD63，CD9，CD81跑WB定量？SBI 说明书后面有写这些是exosomal marker antibodies

芮苏遥

dlwlrma 发表于 2016-10-30 11:37
请问你用的什么细胞呀？1ml就能看到沉淀呀?

我们主要是做消化道肿瘤的，我用的是LOVO-GFP细胞和life的试剂盒，据说沉淀杂质挺多的。要求高的话最好还是超离吧

五月灼蓁

请问一下提细胞培养液外泌体用的试剂盒是这个吗
ExoQuick-TC™
Exosome Precipitation Solution
Cat# EXOTC10A-1

katuysha

芮苏遥 发表于 2016-11-8 14:39
我们主要是做消化道肿瘤的，我用的是LOVO-GFP细胞和life的试剂盒，据说沉淀杂质挺多的。要求高的话最好还 ...

你好，请问你们做WB了吗？有结果吗？我这两天用life的kit提的细胞上清和血浆的外泌体，WB 都没有结果。

芮苏遥

katuysha 发表于 2017-3-22 14:09
你好，请问你们做WB了吗？有结果吗？我这两天用life的kit提的细胞上清和血浆的外泌体，WB 都没有结果。 ...

请问你是用多少ml来源的上清和血浆做的啊？我的1ml上清来源外泌体的WB CD68没结果，猜测是外泌体量少，裂解液稀释蛋白，或者抗体不好用

katuysha

芮苏遥 发表于 2017-4-10 09:29
请问你是用多少ml来源的上清和血浆做的啊？我的1ml上清来源外泌体的WB CD68没结果，猜测是外泌体量少，裂 ...

我用的也是1ml的量，WB一个条带都没有。应该是exosomes的量太少，不过我用的血浆样品年代比较久远，不知道是不是这方面的原因。

zergbloody

katuysha 发表于 2017-4-10 13:34
我用的也是1ml的量，WB一个条带都没有。应该是exosomes的量太少，不过我用的血浆样品年代比较久远，不知 ...

您好，请问血浆提取的步骤和血清有什么区别呢？我刚开始做，想用SBI的试剂提取血浆外泌体。谢谢！

katuysha

zergbloody 发表于 2017-4-15 10:54
您好，请问血浆提取的步骤和血清有什么区别呢？我刚开始做，想用SBI的试剂提取血浆外泌体。谢谢！ ...

根据你kit的protocol说明吧，我没用过SBI的，估计没有很大的区别。

zergbloody

katuysha 发表于 2017-4-17 09:45
根据你kit的protocol说明吧，我没用过SBI的，估计没有很大的区别。

好滴，麻烦啦