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楼主: hzangs
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发表于 2015-4-24 15:53:02 | 只看该作者
同问具体负染了什么,谢谢!
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 楼主| 发表于 2015-4-26 14:12:17 | 只看该作者
微泡biomarker 发表于 2015-4-23 21:34
问一下 负染的 染料是什么啊

染料是一种 铀盐,具体是硫酸铀还是醋酸铀  我记不清了… 以后对事儿了,我去我们院的电镜室再问问吧
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发表于 2015-4-28 13:23:42 | 只看该作者
hzangs 发表于 2015-4-23 11:51
是的。 我将大概2000万 tumor cell 分泌的exosomes 用30ul PBS 充分重悬的。

我用PBS重新混悬,沉淀不太溶解啊~需要超声? 不知道大家是不是也这样 嘿嘿
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发表于 2015-4-28 18:50:30 | 只看该作者
hzangs 发表于 2015-4-23 11:51
是的。 我将大概2000万 tumor cell 分泌的exosomes 用30ul PBS 充分重悬的。

请问下,2000万的细胞是个怎样的概念:25cm规格的培养瓶多少瓶呢?还是用75cm规格的?
谢谢~
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 楼主| 发表于 2015-4-29 11:17:28 | 只看该作者
大琳宝儿 发表于 2015-4-28 13:23
我用PBS重新混悬,沉淀不太溶解啊~需要超声? 不知道大家是不是也这样 嘿嘿 ...

可以反复多吹打一段时间。实在不溶解的可以通过离心去除掉。我没有超声处理过
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 楼主| 发表于 2015-4-29 11:18:41 | 只看该作者
本帖最后由 hzangs 于 2015-6-27 17:54 编辑
kadak007 发表于 2015-4-28 18:50
请问下,2000万的细胞是个怎样的概念:25cm规格的培养瓶多少瓶呢?还是用75cm规格的?
谢谢~ ...

我用的细胞    25cm培养皿  一个长满基本上是1000w细胞。
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发表于 2015-4-29 12:46:43 | 只看该作者
很漂亮的电镜图
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 楼主| 发表于 2015-6-27 12:29:11 | 只看该作者
微泡biomarker 发表于 2015-4-23 21:34
问一下 负染的 染料是什么啊

电镜室老师做的。 记着好像使用的是 铀盐
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发表于 2015-7-5 14:03:14 | 只看该作者
hzangs 发表于 2015-4-23 11:35
exosomes样品10ul 铜网上沉淀1分钟,吸水纸吸去多余液体;负染1分钟,吸水纸吸去多余液体。上机 。
应该 ...

你好~ 能请教你一下,你看电镜时滴的外泌体样的浓度吗?我做的电镜效果感觉总是叠在一起,浓度不好掌握,谢谢
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 楼主| 发表于 2015-7-6 16:10:25 | 只看该作者
jp3266726 发表于 2015-7-5 14:03
你好~ 能请教你一下,你看电镜时滴的外泌体样的浓度吗?我做的电镜效果感觉总是叠在一起,浓度不好掌握, ...

我大概是养了 1000万 肿瘤细胞,3天时间。 这些培液超离。得到的exosome用20ulPBS重悬的。
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