用于exosome提取的无血清培养基怎么制备？

yy8651

bobo 发表于 2015-5-26 19:52
是的，要丢弃多少呢

我也在问这个问题

木瓜31

Johnny 发表于 2015-4-23 18:01
用你的基培将血清配成20%，超速离心 110000g 过夜

为什么要稀释成20%，其他比例可以吗？是因为血清的粘性大？

liuhaoisboy

是去除外泌体了的10%血清培基吧。

liuhaoisboy

luckkit 发表于 2015-4-24 12:25
本人近期正在试验从完全无血清的培养上清中分离EXO，似乎纯度不错，虽然产量低一些，待进一步验证后与大家 ...

大家都知道不同细胞、不同状态、不同环境分泌的外泌体有所不同。你这样不给细胞完全的生长环境，提取的外泌体不担心吗？求教

yy8651

liuhaoisboy 发表于 2015-12-10 11:26
大家都知道不同细胞、不同状态、不同环境分泌的外泌体有所不同。你这样不给细胞完全的生长环境，提取的外 ...

我认为这种方法提取所得大部分是凋亡小体

liuhaoisboy

yy8651 发表于 2015-12-10 11:38
我认为这种方法提取所得大部分是凋亡小体

这样提出来的"外泌体"应该值得商榷

luckkit

liuhaoisboy 发表于 2015-12-9 21:42
这样提出来的"外泌体"应该值得商榷

我们做过Nanosight， 绝大部分小于100nm，凋亡小体似乎比这个大还是符合外泌体的定义的。
此外，我们还进行了WB验证，Markers和阴性对照均符合预期。

hzangs

luckkit 发表于 2015-12-22 05:18
我们做过Nanosight， 绝大部分小于100nm，凋亡小体似乎比这个大还是符合外泌体的定义的。
此外，我们还进 ...

有些细胞对血清饥饿的耐受情况比较好， 所以在无血清培养基的培养下 发生凋亡的时间会比较晚，因此还是可以分到exosome。 只是有些细胞 可能确实会收不到exosome了

zierzier

请问大家，对血清进行超离处理去除外泌体，如何保证血清不被污染呢？

子非鱼

yy8651 发表于 2015-4-23 18:59
非常感谢，那我打算离心12小时。离心力多大呢？11000g是否足够？

你少了一个0