又是我，外泌体小白超离血清的电镜图

程琳 · 发表于 2018-5-2 13:13:17

请问楼主超离血清的步骤是怎样的，我最近也在尝试从血清里提外泌体，试过1ml血清，PBS稀释2000g30min,20000g30min,120000g 80min两次，跑WB没有条带，能分享一下超离步骤吗

hellzhu · 发表于 2018-5-2 15:00:47

程琳发表于 2018-5-2 13:13
请问楼主超离血清的步骤是怎样的，我最近也在尝试从血清里提外泌体，试过1ml血清，PBS稀释2000g30min,20000 ...

你好，感谢回复。我是按照论坛里分享的2006年的那篇protocol来做的。
http://www.exosome.com.cn/forum. ... amp;_dsign=7cdb659a
祝好

15122392869 · 发表于 2018-5-8 14:41:48

请问收集了多少细胞上清呢？

hellzhu · 发表于 2018-5-9 11:43:30

15122392869 发表于 2018-5-8 14:41
请问收集了多少细胞上清呢？

你好，感谢关注。我是做血清的呢

gyousiyuan · 发表于 2018-5-9 21:11:30

请问楼主血清外泌体WB用的什么阴性蛋白呢？

hua2018 · 发表于 2019-9-16 14:15:03

楼主用的多少血清提取的外泌体，最后用多少PBS重悬的呢？样本送样前和运输过程中有没有-80度冻存？

hellzhu · 发表于 2019-9-16 14:34:06

hua2018 发表于 2019-9-16 14:15
楼主用的多少血清提取的外泌体，最后用多少PBS重悬的呢？样本送样前和运输过程中有没有-80度冻存？ ...

你好啊，我用的4毫升的血清提取的外泌体的。最后用的80微升左右的PBS重悬的。我们单位自己有电镜，所以做完就上机看了，没有冻存的。

hua2018 · 发表于 2019-9-16 14:49:26

hellzhu 发表于 2019-9-16 14:34
你好啊，我用的4毫升的血清提取的外泌体的。最后用的80微升左右的PBS重悬的。我们单位自己有电镜，所以做 ...

好的，谢谢你

changingmm · 发表于 2019-9-16 15:16:34

请问上电镜前的染液和时间，我染的外泌体膜很清楚，但是内容物为黑色，背景干净，不知道什么原因~谢谢

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