exosome -free 的血清 获取方式

hzangs

某只包子 发表于 2016-1-26 14:38
需要超速离心这么久（10多个小时）吗？我一直10万g4小时左右。。。
不知道会不会血清里的exosome没有去除 ...

4个小时，还是不行的……   安全起见  超速离心过夜是很有必要的。

某只包子

hzangs 发表于 2016-1-26 17:54
4个小时，还是不行的……   安全起见  超速离心过夜是很有必要的。

超离12h 一般可以去除干净吗？ 除了电镜还有什么能确定是否去除干净？
我明天试试超离过夜，我原来一直用提取exosome的方法去除血清的exosome= =
还好没有开始打老鼠。。。不知道之前的细胞实验会不会受影响。。。我是一个孔20ug exosome（6-well plate）
还有想请问下你们BSA定量可以很准确吗？因为我们有nanno2000分光光度计，我有的时候直接用它测浓度 好像和BSA定量的值不太一样。。不知道你们是每次都用BSA定量吗？

某只包子

wangjoseph 发表于 2016-1-26 15:44
四个小时是不够的，你应该检测去除干净没有啊。
请参考 Baranyai T et al.,  2015, PLOS ONE  ...

感谢~！
一般怎么检测是否去除干净呢？超离过夜就可以吗？

hzangs

某只包子 发表于 2016-1-27 11:06
超离12h 一般可以去除干净吗？ 除了电镜还有什么能确定是否去除干净？
我明天试试超离过夜，我原来一直用 ...

那个东西我们也有。但是从来不用来测蛋白浓度。。。 不准。   都是用BCA定量

某只包子

hzangs 发表于 2016-1-27 11:21
那个东西我们也有。但是从来不用来测蛋白浓度。。。 不准。   都是用BCA定量 ...

好吧= = 感觉之前实验误差确实蛮大的
我不知道我们的离心机能不能过夜- -是BECKMAN的

hzangs

某只包子 发表于 2016-1-27 11:42
好吧= = 感觉之前实验误差确实蛮大的
我不知道我们的离心机能不能过夜- -是BECKMAN的

beckman的不知道，  日立的可以   我们单位是日立的  我经常过夜  o(╯□╰)o    不过最近经常出毛病。。。

某只包子

hzangs 发表于 2016-1-27 11:53
beckman的不知道，  日立的可以   我们单位是日立的  我经常过夜  o(╯□╰)o    不过最近经常出毛病。。 ...

= =不会是因为过夜次数太多了吧  
第一次16h 我还是陪在旁边
刚才去问过工程师了 bechman可以16h 10wg的
对了 你们用的离心管都是一次性的吗？我们之前配了套管子结果居然不是一次性的= =
不知道离血清可以用这种不是一次性的吗= =

weaver

arsenal-xie 发表于 2015-12-30 11:56
可以咨询一下吉泰生物，他们有代理SBI的系列产品，exo-free FBS，价格比较贵，50ml就要2100左右。坛子里还 ...

谢谢。。。。。。。。。。。。。。。。。。。

weaver

子非鱼 发表于 2015-12-31 16:44
我联系过这个人了，也是50ml2100,

我们可不可以一起买，看看他能不能便宜些呢

子非鱼

weaver 发表于 2016-3-2 10:58
我们可不可以一起买，看看他能不能便宜些呢

我的已经到货了