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楼主: hzangs

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用一百块钱的材料自己制作总价值十几万的SBI试剂盒！

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11^#

发表于 2016-4-23 22:26:56 | 只看该作者

太嗨了。谢谢！

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12^#

发表于 2016-4-26 23:04:15 | 只看该作者

确实改善好多

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13^#

发表于 2016-4-28 09:40:40 | 只看该作者

领教了！

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14^#

发表于 2016-5-3 19:20:44 | 只看该作者

楼主我试验了一下，可以看见沉淀，我完全按照帖子来的。有几个问题：
1、我采用先沉淀，后收集所有的exosome沉淀超离提纯。这个时候有个问题，PEG会导致上清中的蛋白质变性沉淀，变性的蛋白质会不会被一起超离下来？
2、如果一起被超离沉淀了，那么其实BCA的方法定量exosome量就不准确了。
所以很多文献中提到的使用沉淀法结合BCA定量其实我觉得很不准确，会把大量的蛋白当做exosome一起定量。

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15^#

楼主| 发表于 2016-5-3 19:27:20 | 只看该作者

本帖最后由 hzangs 于 2016-5-3 19:28 编辑

lenoch 发表于 2016-5-3 19:20
楼主我试验了一下，可以看见沉淀，我完全按照帖子来的。有几个问题：
1、我采用先沉淀，后收集所有的exosom ...

个人感觉，这个方法只适用于缩小超离体积。效果可能确实需要好好考察。
但是，这个方法降低了沉淀法分离exosome的成本，绝对是值得借鉴的。毕竟，现在很多人使用SBI 或者 Life ，那个价格太狠了。而PEG完全可以代替，成本下降百倍……当然，想拿到比较纯的囊泡还是使用其他的分离策略比较好。

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16^#

发表于 2016-8-25 10:33:59 | 只看该作者

hzangs 发表于 2016-4-18 20:18
PEG6000 已预订。应该会在明天入手

有没有使用？结果如何啊？

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17^#

楼主| 发表于 2016-8-25 10:55:23 | 只看该作者

scar5488 发表于 2016-8-25 10:33
有没有使用？结果如何啊？

有的，在分离板块有帖子

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18^#

发表于 2016-9-2 10:47:25 | 只看该作者

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19^#

发表于 2016-10-12 20:47:21 | 只看该作者

好厉害重复性如何？？

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20^#

楼主| 发表于 2016-10-13 09:30:50 | 只看该作者

君扬2009 发表于 2016-10-12 20:47
好厉害重复性如何？？

挺好的。重复过两次。我通常使用超速离心的

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