求助，从exosome提出RNA后的qPCR.

huan1989111007 · 发表于 2015-1-16 22:45:12

muyujun123 发表于 2015-1-14 17:05
因为exosome中u6的含量不太稳定，所以一般人为的加入外参来定量。我也不是很清楚，正在摸索。我觉得可能 ...

可以贴出文献么？U6确实不太稳定表达。求助，相互探索。

大琳宝儿 · 发表于 2015-3-12 11:03:40

我也查了半天，觉得用u6的很少大家都用了什么啊

wenzhouzsl · 发表于 2015-4-28 21:45:45

Exosome 提RNA可以用trizol吗？

yy8651 · 发表于 2015-4-29 16:31:25

请问您目前做的如何了？

wenzhouzsl · 发表于 2015-4-30 19:37:54

我昨天看了电镜，囊泡数量还行，但不知道是不是exosome。

wenzhouzsl · 发表于 2015-5-30 21:19:11

您好，我想问问您现在用的什么基因作为参照？内参or 外参？效果如何？

wanghx_85 · 发表于 2015-6-12 08:52:13

惜名发表于 2015-1-9 09:22
你有相关文献么？可以贴出来分享一下~我对这方面内容目前了解的不多，就以U6作为内参的，是可以跑出来的 ...

我问过相关的技术支持，现在做exo的miR没有公认的内参（也就是说U6是不行滴），设置外参的目的是为了说明不同组别之间的差异并不是由于你操作问题导致的，比如上样量不一样，或是标本污染，我也没有特别搞懂，目前正在研究中，如果你有新进展，希望我们一起探讨~

wanghx_85 · 发表于 2015-6-12 08:55:21

这是我昨天收到的技术支持发给我的文件，关于SBI研究外泌体miR的一些相关设计，感兴趣的可以看一下，我还没来得及看

，有兴趣大家一起交流下~

limitzy · 发表于 2015-6-18 14:24:18

学习了，谢谢

kadak007 · 发表于 2015-9-7 09:53:27

惜名发表于 2015-1-2 14:44
你是做miRNA吧？我用天根的逆转录kit，跑出来循环数较高，25-30个吧。扩增曲线蛮好的~据另一个战友讲，QIAN ...

惜名版主，你有没有用过天根的miRNA荧光定量检测试剂盒？想请教下上游引物设计问题......

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