BCA定量以及SDS-PAGE前外泌体的处理

bokelu · 发表于 2019-3-19 09:44:06

马雪情发表于 2018-10-24 11:24
需要加裂解液吧，文献报道的结论不一致呢，有些说-80℃冻融后外泌体会破碎，但有些报道结论却说富集的外泌 ...

昨天看到一个帖子中的文献说-80解冻以后外泌体表面的蛋白会从膜上解离进入上清，外泌体体积会增大25%左右。你说的这个-80度六个月形态变化不大是在哪里看的，能不能给个文献。

邱邱-- · 发表于 2019-3-25 18:54:02

有没有小伙伴可以交流经验，实验卡住好久做不出来

hzangs · 发表于 2019-5-29 14:25:37

邱邱-- 发表于 2019-3-25 18:54
有没有小伙伴可以交流经验，实验卡住好久做不出来

这个实验先跳过。可以先做别的实验。这个现在不是很重要

CheungKL · 发表于 2019-6-15 11:13:26

同求protocol

DBLB · 发表于 2019-10-20 14:50:04

hzangs 发表于 2019-5-29 14:25
这个实验先跳过。可以先做别的实验。这个现在不是很重要

现在还是希望有一个比较好的蛋白浓度用来做质谱，如果蛋白浓度太低，那就需要很大量的细胞上清去提取细胞外囊泡。

ljcheshen · 发表于 2020-1-9 14:36:17

hzangs 发表于 2019-5-29 14:25
这个实验先跳过。可以先做别的实验。这个现在不是很重要

你好hzangs，我已经弄了电镜和NTA，剩western没弄，但可以先做细胞或者动物，western标志物再慢慢跑是这个意思吗

ljcheshen · 发表于 2020-1-9 14:37:27

hzangs 发表于 2019-5-29 14:25
这个实验先跳过。可以先做别的实验。这个现在不是很重要

是不是鉴定里电镜和NTA的分量是不是更g高？ rg

橘子味ss · 发表于 2020-2-29 14:48:20

同求protocol

muyue · 发表于 2020-8-14 16:11:06

同求protocol

zzzly · 发表于 2021-12-23 20:02:41

科研小白，零基础着手外泌体相关，用的BV2小胶质细胞，饥饿处理24h 70ml上清超速离心提外泌体，离心后看到了白色的沉淀，BCA测浓度为0.25ug/ul左右，但是WB什么都跑不出来想请教下这是怎么回事，是不是没有提出来外泌体

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