外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

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楼主: hzangs
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PEG聚沉+超速离心 试用报告 :Sci Rep文章技术重复

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发表于 2018-12-19 11:17:25 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-5-2 13:26
自己超离去除的

版主,自己超离的话,一般多长时间,之前看您的专栏,是需要14-16个小时,我这边仪器原因,只能离4个小时,可以吗?
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 楼主| 发表于 2018-12-19 12:45:30 | 只看该作者
huangsheng 发表于 2018-12-19 11:17
版主,自己超离的话,一般多长时间,之前看您的专栏,是需要14-16个小时,我这边仪器原因,只能离4个小时 ...

4h 应该是不太可行的。。。
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发表于 2019-1-14 09:12:00 | 只看该作者
本人刚开始做外泌体,请问一下楼里的大神们,细胞在6孔板里长了五天了,第三天的时候密度已经有90%了,还能处理,然后收集细胞上清液吗?会不会细胞老化了,分泌外泌体就少了啊
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 楼主| 发表于 2019-1-15 14:38:18 | 只看该作者
桃花灼灼 发表于 2019-1-14 09:12
本人刚开始做外泌体,请问一下楼里的大神们,细胞在6孔板里长了五天了,第三天的时候密度已经有90%了,还能 ...

6孔板收集培液还想做外泌体 o(╯□╰)o     大家一般是10cm 盘子   五六盘起
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发表于 2019-1-15 16:41:45 | 只看该作者
hzangs 发表于 2019-1-15 14:38
6孔板收集培液还想做外泌体 o(╯□╰)o     大家一般是10cm 盘子   五六盘起

前面想先做电镜,看了一下好像电镜需要的量不是很多
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 楼主| 发表于 2019-1-17 19:05:55 | 只看该作者
桃花灼灼 发表于 2019-1-15 16:41
前面想先做电镜,看了一下好像电镜需要的量不是很多

NTA用量不大。 但是电镜用量可不小。  如果起始体积小了, 电镜下找不到结构。
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发表于 2019-1-18 10:32:22 | 只看该作者
hzangs 发表于 2019-1-17 19:05
NTA用量不大。 但是电镜用量可不小。  如果起始体积小了, 电镜下找不到结构。 ...

恩恩好的,本来是打算先送样去做NTA,再做电镜的,我是用的试剂盒提外泌体,50ml细胞上清提的外泌体去做NTA可以吗
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发表于 2019-3-11 14:50:57 | 只看该作者
初步实验   可以试一试
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发表于 2019-7-13 16:27:06 | 只看该作者
这个方法适合提取血浆外泌体吗?
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发表于 2019-8-13 20:59:29 | 只看该作者
版主好,我看到这个有个问题,如果用含有病毒的细胞上清分离外泌体,那PEG沉淀法会不会把病毒也沉淀下来?那最后一步用PBS洗,然后超离,能把病毒和外泌体分开吗?因为如果后面想要研究外泌体是否能够传输某病毒,这里会产生干扰吗?
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