做WB前外泌体处理

步步唧唧 · 发表于 2017-6-29 11:05:05

hzangs 发表于 2017-6-21 12:33
嗯嗯

版主问一下提取到的外泌体跑WB，是exo直接加缓冲液煮，然后直接做跑WB吗？那不是所有蛋白都会跑出来吗？怎么鉴定标志戴白CD9\CD63\TSG101什么的啊？如何区分？用什么Marker

yh161 · 发表于 2017-8-2 22:39:30

hzangs 发表于 2017-5-29 11:17
1、定量方法要么使用蛋白定量如BCA等，要么使用粒子数定量如NTA等。
2、ELISA ...

请问楼主，那BCA怎么测呢？ pbs重悬之后就直接用BCA测吗？不用加裂解液吗？

纪南方 · 发表于 2017-8-3 09:34:36

请问大神们用的是哪家的抗体啊?

EV-yyb · 发表于 2017-10-20 23:37:38

猫头鹰爱睡觉觉发表于 2017-3-2 11:35
我超离的exo，沉淀直接加20ulPBS重悬，冻在-80度一个月后跑WB都可以，直接加5X loading buffer 98度变性5分 ...

那请问你加多少loading，上多少外泌体的量呢？

atropine90 · 发表于 2017-10-31 21:09:07

步步唧唧发表于 2017-6-29 11:05
版主问一下提取到的外泌体跑WB，是exo直接加缓冲液煮，然后直接做跑WB吗？那不是所有蛋白都会跑出来吗 ...

感觉这位层主连WB的原理都不清楚啊.... 敷抗体啊！

lz93046 · 发表于 2017-11-1 22:04:47

上多少样呢？

布酱 · 发表于 2018-3-22 09:11:32

hzangs 发表于 2017-6-21 12:33
嗯嗯

新手一枚，请问hzangs老师，做WB前期处理上样缓冲液一般用什么，金属浴还是水浴？时间是多久？

hzangs · 发表于 2018-3-22 11:47:15

布酱发表于 2018-3-22 09:11
新手一枚，请问hzangs老师，做WB前期处理上样缓冲液一般用什么，金属浴还是水浴？时间是多久？ ...

跟常规的WB 一样操作即可

布酱 · 发表于 2018-3-22 14:23:18

hzangs 发表于 2018-3-22 11:47
跟常规的WB 一样操作即可

好的，谢谢

zhangning · 发表于 2018-11-18 21:18:42

楼主楼主，现在求教，pbs重悬的exo到底应该怎么处理

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