外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

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楼主: hzangs
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发表于 2015-7-9 21:48:50 | 只看该作者
effiezhang66 发表于 2015-4-23 11:40
这样的样本可以储存吗?因为是在别的单位约电镜的

负染电镜样品可以保存,但要求干燥条件,吸湿后会引起染盐性质改变,从而会影响观察。
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发表于 2015-7-9 21:50:00 | 只看该作者
微泡biomarker 发表于 2015-4-23 21:34
问一下 负染的 染料是什么啊

甲酸铀或者乙酸铀,都行
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发表于 2015-7-21 10:56:12 | 只看该作者
hereissyk 发表于 2015-4-24 15:53
同问具体负染了什么,谢谢!

醋酸双氧铀
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发表于 2015-8-30 00:13:56 | 只看该作者
请问大神是用超离,还是用kit提的
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 楼主| 发表于 2015-8-31 16:12:44 | 只看该作者
好时之梦 发表于 2015-8-30 00:13
请问大神是用超离,还是用kit提的

超速离心得到的。  你可以问下johnny  他用sbi的kit 做过。 并且电镜图也不错
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发表于 2015-12-4 22:57:13 | 只看该作者
超速离心大概的步骤是什么啊。用多少g呢?
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 楼主| 发表于 2015-12-5 10:35:17 | 只看该作者
SHANKUN 发表于 2015-12-4 22:57
超速离心大概的步骤是什么啊。用多少g呢?

2000g 10min 取上清
10000g 30min 取上清

100000g 90min 取沉淀
PBS洗一次
100000g 90min 取沉淀
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发表于 2015-12-14 11:56:12 | 只看该作者
hzangs 发表于 2015-12-5 10:35
2000g 10min 取上清
10000g 30min 取上清

简洁有力,赞!
hzangs大神,请教一个问题,你提取细胞上清外泌体前,细胞是用无血清培养基培养的?还是培养基超速离心了?
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 楼主| 发表于 2015-12-14 13:59:48 | 只看该作者
子非鱼 发表于 2015-12-14 11:56
简洁有力,赞!
hzangs大神,请教一个问题,你提取细胞上清外泌体前,细胞是用无血清培养基培养的?还是 ...

我是过夜超离血清制作exosome-free FBS,然后用这个FBS配培液养细胞。  具体的流程 可以参考我之前的帖子
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发表于 2015-12-14 14:06:46 | 只看该作者
hzangs 发表于 2015-12-14 13:59
我是过夜超离血清制作exosome-free FBS,然后用这个FBS配培液养细胞。  具体的流程 可以参考我之前的帖子 ...

多谢多谢!没有超离的孩子真是愁啊~~
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