PEG聚沉+超速离心试用报告：Sci Rep文章技术重复

wxhljq · 发表于 2016-4-27 17:19:51

本帖最后由 hzangs 于 2016-4-27 17:44 编辑

你觉得这方法得到的杂蛋白多么？

hzangs · 发表于 2016-4-27 17:46:12

wxhljq 发表于 2016-4-27 17:19
你觉得这方法得到的杂蛋白多么？

PEG+超速离心清洗这个方法还可以。
如果你用一个十几毫升或者几十毫升PBS的体系进行清洗这一步的话，结果杂蛋白量应该会和超速离心差不多，甚至比超速离心效果好。如果你后面洗的这一步用小体系进行清洗的话可能杂蛋白会多一些。但总体讲要比单纯沉淀的方法好不少。

Jimson · 发表于 2016-4-27 23:28:24

本帖最后由 Jimson 于 2016-4-27 23:43 编辑

如果有电镜结果就完美了。顶顶顶

子非鱼 · 发表于 2016-4-28 11:24:38

斑竹，用来做细胞功能的exo是需要新鲜提的呢？还是也可以冻起来？我做了两次，都是把exo提出来放4度，等细胞准备好了，再对细胞处理，但是因为有的时候不凑巧，而exo又不能在4度存放超过一周。看文献总是说提取exo后-80度保存备用，不知道这个适用于功能试验吗

hzangs · 发表于 2016-4-28 12:44:04

子非鱼发表于 2016-4-28 11:24
斑竹，用来做细胞功能的exo是需要新鲜提的呢？还是也可以冻起来？我做了两次，都是把exo提出来放4度，等细 ...

这个我没有做过尝试

你可以试一试。

子非鱼 · 发表于 2016-4-29 22:43:30

hzangs 发表于 2016-4-28 12:44
这个我没有做过尝试你可以试一试。

那我也不尝试了。。。

hzangs · 发表于 2016-4-29 23:22:21

子非鱼发表于 2016-4-29 22:43
那我也不尝试了。。。

思想滚得远 · 发表于 2016-5-2 11:55:34

hzangs 发表于 2016-4-27 16:54
你用 DC细胞或者MSC 或者胰腺癌细胞就知道了那产量，简直是细胞把自己粉碎了然后往外吐 ex ...

请问是无血清培养基提的Exosome么，还是去exosome血清培养基提取的exosome，我用MSC无血清培养基并不能看到大量沉淀

hzangs · 发表于 2016-5-2 12:26:08

思想滚得远发表于 2016-5-2 11:55
请问是无血清培养基提的Exosome么，还是去exosome血清培养基提取的exosome，我用MSC无血清培养基并不能看 ...

我使用的是去除exosome的血清。

思想滚得远 · 发表于 2016-5-2 13:09:20

hzangs 发表于 2016-5-2 12:26
我使用的是去除exosome的血清。

是SBI的那种去exosome血清么还是自己超离去除的exosome

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