菜鸟求助 细胞培养上清SBI 试剂外泌体分离

宝莲

我用life的试剂盒，20ml无血清的细胞培养上清提取也没有沉淀，做电镜可以看到少量外泌体。

muzi.csu

好像可以收集大量细胞上清，用超滤离心管浓缩一下，再用试剂盒分离外泌体。我之前用5,10,15ml细胞上清都没看见沉淀，后来收集了70ml浓缩后再分离就看到沉淀了...

六月の雪

muzi.csu 发表于 2015-4-27 12:43
好像可以收集大量细胞上清，用超滤离心管浓缩一下，再用试剂盒分离外泌体。我之前用5,10,15ml细胞上清都没 ...

求指教，如何浓缩的，用的什么规格的超滤离心管，另外，你的Exo-Free的SBI血清是多少钱买的啊？

yy8651

六月の雪 发表于 2015-4-29 14:47
求指教，如何浓缩的，用的什么规格的超滤离心管，另外，你的Exo-Free的SBI血清是多少钱买的啊？ ...

据有人说250ml   7K左右

muzi.csu

六月の雪 发表于 2015-4-29 14:47
求指教，如何浓缩的，用的什么规格的超滤离心管，另外，你的Exo-Free的SBI血清是多少钱买的啊？ ...

我买的是3KD的  15ml的超滤管。exo-free好像是将近2000元买的小规格

daidiu2003

请问“用SBI公司的Exoquick-TC分离肿瘤细胞培养上清中的外泌体”，Exoquick-TC有说明书吗？是按着说明书操作就好？可以跟你请教点详细的实验步骤不？我们也是实验条件有限，老板胸怀大志。。。好担心不能毕业~~谢谢你了~

六月の雪

daidiu2003 发表于 2015-5-18 22:34
请问“用SBI公司的Exoquick-TC分离肿瘤细胞培养上清中的外泌体”，Exoquick-TC有说明书吗？是按着说明书操 ...

https://www.systembio.com/micror ... exosomes/literature
SBI公司官网有说明书下载

bobo

muzi.csu 发表于 2015-5-12 15:54
我买的是3KD的  15ml的超滤管。exo-free好像是将近2000元买的小规格

请问，这个超滤管是什么牌子的呢？用多少转数离心呢？离心后用什么重悬呢？为什么选择3KD的呢？

evomicscience

PEG-based exosome isolation method is not accepted by most of researchers in this year ISEV meeting yet. Actually, rejected! Most is seeking other products. The problem of this kind of method is that the both purity and yield are too low.

yy8651

muzi.csu 发表于 2015-5-12 15:54
我买的是3KD的  15ml的超滤管。exo-free好像是将近2000元买的小规格

请问您是如何浓缩的呢？能不能分享一下？