大家关于试剂盒的几点疑问和澄清

seallin

Izon 发表于 2015-10-28 15:30
你的这个数据是颗粒浓度，不是粒径吧。

关于颗粒浓度，手上正好有几张图，大家可以比较一下：

测试参数的不同，确实会有所差别，不过貌似不会有数量级上的差别吧

Izon

seallin 发表于 2015-10-28 15:44
测试参数的不同，确实会有所差别，不过貌似不会有数量级上的差别吧

结果都是用100nm+200nm标准样品1：1配好来测的。应该了解一下这个“浓度”是怎么“测”出来的，跟什么有关系，这样就不难理解为什么有数量级的差别啦。
其实好多人都frustrate这个问题了

seallin

Izon 发表于 2015-10-28 15:59
结果都是用100nm+200nm标准样品1：1配好来测的。应该了解一下这个“浓度”是怎么“测”出来的，跟什么有关 ...

我知道，和斯托克斯方程有关，系数不一样，最后的浓度就不一样啦

Izon

seallin 发表于 2015-10-28 16:14
我知道，和斯托克斯方程有关，系数不一样，最后的浓度就不一样啦

还有光源，photo detector, 颗粒对光的scattering，大颗粒的影响，溶液离子强度等。反正要是测量结果有什么不同，不一定是你的样品本身不同。不过要是不在意准确性和重现性，或者有人说有数据总比没有强的话，Ok啦。

seallin

Izon 发表于 2015-10-28 16:42
还有光源，photo detector, 颗粒对光的scattering，大颗粒的影响，溶液离子强度等。反正要是 ...

和文献对比可能会出现参数不同的问题，但是不至于差好几个数量级。但是自己的横向对比因为参数一致，所以这点影响可以忽略不计

Izon

seallin 发表于 2015-10-28 16:45
和文献对比可能会出现参数不同的问题，但是不至于差好几个数量级。但是自己的横向对比因为参数一致，所以 ...

有机会的话，你稀释一个浓度梯度测测看，看能不能给你一个意外的结果。

不过目前国内关注外泌体准确定量的还不多，但是大家都奔着application去的，不管是diagnostic还是therapy, 以后标准化，准确，重现性好的定量方法肯定是要有的。

hzangs

seallin 发表于 2015-10-28 15:11
你的例子还有数值很有道理，请问你60ml培养液最后得到多少微克蛋白？另外马尔文的仪器在测试的时候，一旦 ...

这个涉及到了我们细胞系的特性和后面发表时候的相关数据，所以具体细节不便透露，还请见谅。 因为不是用的马尔文的仪器，所以不存在1E9这个界限。确实稀释了，但是稀释倍数也只能暂且保密，毕竟我已经将粒子数的数据放出来了。 还望见谅

seallin

Izon 发表于 2015-10-28 16:54
有机会的话，你稀释一个浓度梯度测测看，看能不能给你一个意外的结果。

不过目前国内关注外泌体准确定量 ...

对，很有道理，不过方法也是为应用服务的

seallin

hzangs 发表于 2015-10-28 17:48
这个涉及到了我们细胞系的特性和后面发表时候的相关数据，所以具体细节不便透露，还请见谅。 因为不是用 ...

理解，不知除了Lobb那篇，还有哪些文献是用粒子数/蛋白量这个指标的，可否推荐几篇文献，非常感谢

hzangs

seallin 发表于 2015-10-28 20:20
理解，不知除了Lobb那篇，还有哪些文献是用粒子数/蛋白量这个指标的，可否推荐几篇文献，非常感谢 ...

你要是有更好的反应exosomes样品中exosomes纯度的指标 也行 呵呵