想统计下大家用超速离心时一次用多少量的细胞上清才够用

lxblqy · 发表于 2016-5-23 20:30:42

30mL试过，能有肉眼可见的沉淀；然而增加到120mL时仍只有少量沉淀，感觉没有比30mL增加多少。不过还没做过定量试验。

exo · 发表于 2016-5-24 10:57:53

Julie_1991 发表于 2016-4-26 20:03
35ML/管，每次2~8管。

能肉眼可见吗

Julie_1991 · 发表于 2016-5-25 19:50:42

35ML可见。我还离过9ML，肉眼观无明显变化。

Johnny · 发表于 2016-5-26 11:07:08

Julie_1991 发表于 2016-5-25 19:50
35ML可见。我还离过9ML，肉眼观无明显变化。

什么细胞的上清？

Julie_1991 · 发表于 2016-5-31 16:06:52

气道上皮细胞

arrowleeincmu · 发表于 2016-6-12 15:53:44

同问各路大神老师，一般多少细胞上清够做电镜？25ml?

stones · 发表于 2016-6-29 22:08:47

CAAS 发表于 2015-7-23 14:47
200ml，life 的exosome 提取试剂

那你提一次要2瓶life的试剂，6000+哇。。。感觉经费像水一样留。

hbxghjh · 发表于 2016-7-1 14:56:15

做电镜一点点重悬液就好

vincent · 发表于 2016-7-10 16:29:40

luckkit 发表于 2015-4-24 12:38
另外，请教一下，俺是收集上清后直接2000g 30min,然后0.22um过滤，10e4 30min, 10e5 2hrs, 开始没有300g 10 ...

个人觉得应该首先合适离心力完整较少破坏的分离出细胞，再加大离心力分离碎片。一开始就介入大离心力导致细胞破裂。细胞内的复杂物质释放增加。可能会影响后续试验。

vincent · 发表于 2016-7-10 16:31:36

暮色恭喜发财发表于 2015-8-18 10:38
请教一下，0.22um过滤的目的是什么？

去除大的非exosome的囊泡。纯化作用

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