PEG聚沉+超速离心试用报告：Sci Rep文章技术重复

淘芝夭夭 · 发表于 2016-5-9 09:58:51

我们差速超离时基本没看到任何沉淀

clavichord · 发表于 2016-5-10 21:29:08

原文已看，文中的z-stacks是个什么意思

clavichord · 发表于 2016-5-10 21:44:56

hzangs 发表于 2016-4-27 16:54
你用 DC细胞或者MSC 或者胰腺癌细胞就知道了那产量，简直是细胞把自己粉碎了然后往外吐 ex ...

楼主做过msc？？

clavichord · 发表于 2016-5-10 21:47:20

hzangs 发表于 2016-5-2 12:26
我使用的是去除exosome的血清。

可能血清中也有相关蛋白

clavichord · 发表于 2016-5-10 21:49:07

5五吾发表于 2016-5-4 21:18
请问用0.22um的filter可以吗？

这个我也好奇呢

clavichord · 发表于 2016-5-10 22:49:46

为什么去除血清的外泌体的方法是10万离心速度，20h？？？不能优化了么

hzangs · 发表于 2016-5-11 10:29:22

clavichord 发表于 2016-5-10 21:44
楼主做过msc？？

我不做MSC

lenoch · 发表于 2016-5-11 12:49:26

5五吾发表于 2016-5-4 21:18
请问用0.22um的filter可以吗？

我用的是0.22的，个人感觉会使exosome更纯一些，至少220nm以上的都滤掉了。会使你的电镜和nanosight更好看。所以我建议你做这两个时候用这方法，如果要做现象，需要更多的EV，就用0.45，这样得率会高很多。至少，大家都是MV。

woshiyywlly · 发表于 2016-5-12 14:42:34

我按前面的步骤试了下，同时取相同体积的培液，用Life的exosome isolation kit 作为对照，离心后目测PEG提出来的要比life的试剂盒少一半的样子，沉淀还没洗，不知道洗完之后还能剩多少exosome

hzangs · 发表于 2016-5-12 18:39:09

woshiyywlly 发表于 2016-5-12 14:42
我按前面的步骤试了下，同时取相同体积的培液，用Life的exosome isolation kit 作为对照，离心后目测PEG提 ...

感谢分享

单看沉淀好像意义不大。毕竟大部分都是杂蛋白。还是要看洗一次超离后的量了~

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